抗拟除虫菊酯类农药scFv的抗体基因技术需求
价格 双方协商
地区: 天津市 市辖区 滨海新区
需求方: 天津**大学
行业领域
生物与新医药技术
需求背景
拟除虫菊酯类(Pyrethroids)农药是一类重要的仿生性杀虫剂,过去一直被认为是一种安全的农药。因其在体内具有容易被氧化酶系统降解,无蓄积性等优点,目前应用普遍、用量较大,占杀虫剂总产量的20%,占整个杀虫剂使用面积的25%。但最近有研究表明,大部分拟除虫菊酯类农药属于环境激素类物质,具有免疫系统毒性、遗传毒性和心血管毒性,严重影响哺乳类动物的正常生理活动,即使是低剂量,长期接触也容易引起慢性疾病,有些还会有致畸、致癌、致突变等作用。因此,如何有效去除农产品中该农药的残留已成为人们广泛关注的问题。
因为这类农药残留物的含量极微,因此要求高度灵敏的检测技术。已报道的拟除虫菊酯类农药残留量测定方法有气相色谱(GC)法、酶联免疫吸附(ELISA)等。GC法使用高灵敏度的电子捕获检测器,因而对样品的净化要求严格,并增加了分析流程时间。这就迫切需一种新的快速检测的方法;普通的酶联免疫法虽灵敏度高、样品容量大,却存在实验动物需量大、饲养周期长,不同动物个体对农兽药敏感程度不同,造成抗体差异大等问题;单克隆抗体作为第二代抗体。
需解决的主要技术难题
由于制备和筛选过程繁琐,本需求需要对一下内容进行改进:
1.且对操作技术要求很高,克隆后的细胞遗传容易不稳定等原因,不利于广泛应用。需寻求更专业规范的技术加以改进
2.需提供淘选抗体库,以便处理噬菌体抗体、去干扰化处理液,以增强淘选的针对性
期望实现的主要技术目标
a.向离心后的细胞中加入350μl Buffer RLT裂解缓冲液,轻弹管壁,用移液枪吹打,使缓冲液与细胞充分接触
b.加入同等体积的70%的乙醇溶液,移液枪轻轻吸打混匀,注意不要离心
c.室温下12000rpm离心15s,弃去流出液
d.计了兼并引物,该引物能全面地覆盖鼠源抗体重链和轻链的多样性,尤其是轻链引物除了包括一般的kappa轻链引物,还包括了lambda轻链引物,以防止部分目的基因的丢失
需求解析
解析单位:天津市滨海新区 解析时间:2023-05-17
吴正斌
天津中科先进技术产业有限公司
总经理
综合评价
处理进度