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行业领域

生物与新医药技术

需求背景

外自70年代开始对水产动物病原菌的致病机理特别是胞外产物的致病性进行了广泛的研究，把水产动物疾病的控制深入到分子细胞学、遗传学和免疫学领域。而国内在这方面的研究甚少，没有从本质上对病原菌及其致病性进行系统的认识，在水产养殖病害的防治工作上存在很大的盲目性，使我国的水产疾病控制技术长期处于操作简单、效果低微的局面

本研究拟对不同水体养殖中假单胞菌的污染情况进行调查，对该菌进行分离鉴定、致病性、毒力的大小分析，以及环境因素(诸如水温偏高或偏低、pH值过酸或过碱、充氧的有无)的改变,对细菌致病性的影响进行探讨，测定其胞外产物及其毒性因子的生物学特性和毒性的大小，旨在摸清不同水体养殖条件下假单胞菌的流行病学状况，提出防控措施，阐明假单胞菌的致病机理,为水产养殖的细菌病防治提供理论基础。

需解决的主要技术难题

形态和染色特性：假单胞菌属细菌是直的或微弯的杆菌,属间细菌相差较大,长度为***～5.0μm,宽***～1.0μm。革兰氏阴性无芽孢杆菌，无菌柄也无鞘。许多种通过染色镜检可观察到聚β-羟基丁酸盐即苏丹黑颗粒。典型的鞭毛为极毛，以单极或数条极毛运动，罕见不运动者。

培养特性：假单胞菌属中的种易于培养,在营养凉脂上生长很快。为专性需氧菌。对温度要求范围较宽,一般可在30℃～37℃很好地生长,少数种能在4℃或41℃生长。生长pH也较宽,假单胞菌属属于非发酵型细菌,只能氧化分解糖类,产酸量较少,细菌本身对酸的耐受性也不大。本属大多数的种不需生长因子,在无机盐基础培养基(MBM)中加入一种有机碳源,就可以利用钱盐为氮源,以单一碳源进行生长。由此可以和需要生长因子的细菌区别。细菌在生长中可产生各种水溶性色素,如绿脓素(pyoeyanin)、红脓素(pyrorubin)、荧光素(pyvoerdin)和黑脓素等。有的假单胞菌可产生几种色素,有的只产生一种色素,有的不产生色素。本属中产生细胞色素C丰富的菌种,培养数日一般在菌落菌苔表面呈淡红色。在选择性培养基如SS琼脂、麦康凯琼脂上是否生长,也是菌种鉴定的性状之一。

生理生化特性：绝大多数此属菌种为葡萄糖氧化型，少数种不分解葡萄糖或缓慢分解葡萄糖而不产酸。但决无发酵葡萄糖的,为非发酵菌。能还原硝酸盐，甲基红和V-P实验阴性，触酶阳性，大多数菌种的氧化酶阳性；除腐败假单胞菌外,H₂S产生都是阴性,不产生吲哚。绝大多数菌种不需要生长因子,可以在铵盐葡萄糖培养基中生长,也可在西蒙氏柠檬酸盐琼脂上生长。临床常见的种，赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶阴性；精氨酸双水解酶的反应因种而不同,在属内种的鉴别上有用。各种水解酶类在假单胞菌的鉴别上使用,常用的水解试验的底物有尿素、七叶灵、吐温80、淀粉、DNA、卵磷脂、明胶和乙酸胺。

期望实现的主要技术目标

国外自70年代开始对水产动物病原菌的致病机理特别是胞外产物的致病性进行了广泛的研究，把水产动物疾病的控制深入到分子细胞学、遗传学和免疫学领域。而国内在针对不同水体养殖环境中的病原菌的流行病学及其致病力情况尚未进行过系统的调研，在水产养殖病害的防治工作上存在很大的盲目性，使我国的水产疾病控制技术长期处于操作简单、效果低微的局面。本研究通过对湖泊、水库、稻田、池塘、滩涂等不同水体养殖环境的水体、污泥、鱼体的假单胞菌的存在情况、致病力因素及强弱以及该菌对常规药物的敏感性等进行系统研究，制定出控制不同水体假单胞菌的防控措施，提高水产疫病防控技术。

需求解析

解析单位：重庆市永川区 解析时间：2022-10-27

王娟

重庆医科大学

主任

综合评价

该技术需求足够清晰

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