一种Viili胞外多糖及其制备方法专利转化服务需求

发布时间: 2022-11-17

截止日期:2023-11-17

预算双方协商

基本信息

地区：天津市市辖区滨海新区

需求方：天津***技处

行业领域

生物产业

需求描述

1.服务需求背景:

胞外多糖(Exopolysaccharides，EPS)是微生物在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的粘液或荚膜多糖，易与菌体分离。微生物多糖不仅可以作为胶凝剂、保鲜剂、乳化剂、成膜剂等添加剂用于食品和制药行业来改变产品的黏度和硬度，而且还具有抗氧化、抗衰老、增强免疫以及降胆固醇等多种功能。因此，这些多糖成为具有特定生理活性物质的重要来源，开发和利用这些具有特定生理功能的胞外多糖已经成为药物研究和功能食品生产的前沿领域之

Viili是一种起源于北欧的传统发酵乳制品，又叫Vilia，Filia，是芬兰的一种民俗食品，质地黏稠，与我国传统的酸乳相似，呈丝状，味美，微甜，风味独特。Viili中含有细菌、酵母菌和丝状真菌等多种微生物。Viili独特的黏稠性被认为是由其中乳酸菌产生的胞外多糖所致，据报道，Viili胞外多糖能降低小鼠血液中胆固醇的水平，也具有由B淋巴细胞有丝分裂活动刺激所介导的抗癌特性。此外，Viili胞外多糖还具有促进益生菌与肠黏膜的吸附等重要生理活性。

2.服务需求具体内容:

1.一种Viili中胞外多糖的制备方法，其特征在于：方法步骤如下：(1)发酵：纯牛乳灭菌，按1％～3％接种量接种Viili，将接种后的牛乳置于25-35℃培养箱中，培养15～17h后取出，置于4℃冰箱中4～8h，得到发酵乳；(2)等电点法除酪蛋白：用饱和NaOH溶液调发酵乳的pH至***，离心、取上清液，再用HCl调节上清液pH至***，再离心，再调上清液的pH至***；(3)酶解：在上述上清液中加入1/6总体积的胰酶液，胰酶液浓度为2-5g/L，水浴下酶解2-3h，3000r/min，离心15min，得到酶解液；(4)脱蛋白：以酶解液∶氯仿∶正丁醇＝30∶8∶1进行蛋白质沉淀1-3h，离心，去除沉淀，得到的滤液中无游离蛋白；(5)乙醇沉淀：将步骤(4)所得滤液预冷，加入5～6倍体积的预冷无水乙醇，置于1-5℃冰箱中沉淀40-55h，本步骤中多糖呈絮状沉淀析出，取沉淀；(6)透析：将经过步骤(5)得到的沉淀用截留14kDa分子量的透析袋在超纯水中透析25-30h，得沉淀物，在低于50℃下进行真空干燥，得到Viili胞外粗多糖。

2.根据权利要求1所述的Viili胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述Viili胞外粗多糖还经过以下步骤：离子交换柱层析：将Viili胞外粗多糖用5mL蒸馏水溶解，上DEAE纤维素柱，每管4mL分管收集，洗脱步骤如下：①使用去离子水洗脱DEAE纤维素柱，得到一种胞外多糖组分V-I，出现在第6～40管中，最高吸收峰OD值达到***，当洗脱超过2h之后没有明显的多糖成分被洗脱下来；②使用***的NaHCO3洗脱DEAE纤维素柱，得到两种多糖组分V-II、V-III，分别出现在第6～10管、第21～40管中，其最高峰OD值分别为***和***，当洗脱超过2h之后没有明显的多糖成分被洗脱下来；③使用***的NaOH洗脱DEAE纤维素柱，得到一种胞外多糖组分V-IV，出现在第20～32管中，其最高峰OD值为***，当洗脱超过2h之后没有明显的多糖成分被洗脱下来。