科创中国

本发明一种识别环境水体样品中MIB产嗅藻种类的方法，本发明方法将水体中的细胞与丙烯酰胺反应，制成单细胞凝珠；接着进行细胞溶解处理后，再依次进行融合PCR、Block PCR、巢式PCR反应，并对巢式PCR反应产物进行基因测序，将测序结果与NCBI数据库进行比对，获知水体中携带产MIB的mic基因的藻类的种类。本发明方法通过对mic基因及16S rRNA基因引物的选择及扩增条件的优化，建立针对MIB产嗅藻的单细胞融合PCR方法，本发明方法可以在未培养的单细胞中实现mic功能基因与系统发育基因的连接，并且通量高，成本低，能精准识别环境样品中全部产嗅藻，且可特异性地识别环境样品中产嗅藻。

1、本发明选择的特异性引物经测序验证可以用于MIB产嗅藻的精准识别。2、本发明方法在我国青草沙水库环境样品中应用，测序结果表明该方法可以实现功能基因(mic基因)与16S基因的连接，达到识别MIB产嗅藻的目的。3、相比于纯藻分离鉴定及宏基因方法，该方法成本低，通量高，可以实现环境样品中MIB产嗅藻的精准识别。

传统的鉴别水体中的产MIB蓝藻的方法为纯藻分离培养及MIB检测，由于水体中蓝藻种类众多且存在不可培养的藻种，该方法随机性较大，成功率低，鉴别结果的准确性差，基本无法实现将环境样品中全部蓝藻进行分离并鉴定MIB产生情况。宏基因组测序研究对象仅为优势物种，不适用于通常不成为优势物种的产嗅藻。

而由于本发明方法是在未培养的细胞中连接mic基因和系统发育基因，不受限于细胞是否可培养，可以用于识别全部MIB产嗅藻，应用前景广阔。

实验室固定人员总数为80人，包括中国工程院院士2名，国家杰出青年基金获得者6名，并建有国家基金委“环境微界面过程与污染控制”创新研究群体（2013年进入创新三期）。

本发明方法基于单细胞融合PCR技术，精准识别环境水体中MIB产嗅藻，克服了藻种分离无法做到识别全部MIB产嗅藻，宏基因方法无法进行稀有物种功能基因的宿主识别的技术缺陷，可以在单细胞中实现mic功能基因与系统发育基因的连接，并且通量高，成本低，能实现环境样品中全部MIB产嗅藻的精准识别。

本科技成果支持技术转让，服务等多种方式，有针对性进行指导转化