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本发明涉及快速病理检测的技术领域，公开了一种暗场反射紫外光学显微成像方法，包括以下步骤：S10：获取组织样品；S20：将组织样品放置在载物台上，由紫外光源产生的紫外光斜入射至组织样品上；利用紫外光学系统收集来自组织样品的紫外反射光，并通过组织样品的浅表层漫反射光的亮信号和细胞核吸收紫外入射光的暗信号来获得紫外暗场反射图像。基于紫外光的暗场照明，在消除镜面反射光和散乱光干扰的情况下，利用细胞核吸收紫外光产生的暗信号和生物组织浅表层漫反射产生的亮信号来提供图像对比度。该方法无需荧光染色，样品也无需特殊切片处理，能快速、准确、高信背比地提供病理组织成像结果，为术中切缘评估提供了快速、准确的参考依据。

1.一种暗场反射紫外光学显微成像方法，其特征在于，包括以下步骤： S10：获取组织样品； S20：将组织样品放置在载物台上，由紫外光源产生的紫外光斜入射至组织样品上； 利用紫外光学系统收集来自组织样品的紫外反射光，并通过组织样品的浅表层漫反射光的亮信号和细胞核吸收紫外入射光的暗信号来获得紫外暗场反射图像。 2.如权利要求1所述的一种暗场反射紫外光学显微成像方法，其特征在于，在步骤S20中，采用具有选自光波长的中心位于如下波长处或位于如下波长附近的波段的紫外光源：290nm；280nm；270nm；260nm；250nm；245nm；240nm；235nm；230nm；225nm；220nm；210nm；200nm； 其中，所述紫外光源包括如下中至少之一：LED；激光器；可调激光器；或者连续源，所述连续源包括但不限于连续激光光源、电弧灯、激光点火电弧灯、氪-溴准分子灯至少之一。 3.如权利要求2所述的一种暗场反射紫外光学显微成像方法，其特征在于，所述紫外光学系统包括物镜和图像传感器，紫外反射光透射过所述物镜，并被所述图像传感器接收。

组织病理检测是生物医学诊断的一项重要手段，常规的组织病理检测过程包括：先取一块术中切除的组织，然后将其包埋在石蜡块里，切成薄片，再用苏木精－伊红(Hematoxylin-eosin，HE)染色，最后用显微镜观察并得出相应的病理诊断结果。但是常规的石蜡切片病理检测时间较长，通常需要3-4天，无法对需要快速诊断结果的术中切缘评估提供帮助。

目前，临床手术中往往采用冰冻切片的方式来代替石蜡包埋切片，该过程包括取样、包埋、冷冻、切片、染色和观察诊断，所需时间一般在30分钟或更久。然而，冰冻过程往往会导致组织样品出现破碎的小孔，影响病理医生的判断和诊治，大大限制了冰冻切片技术在术中切缘评估的使用。

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与现有技术相比，本发明提供的一种暗场反射紫外光学显微成像方法，通过紫外光斜入射至组织样品，基于紫外光(主要是260nm，该波长是细胞核的吸收峰)的暗场照明(斜入射)，在消除镜面反射光和散乱光干扰的情况下，利用细胞核吸收紫外光产生的暗信号和生物组织浅表层漫反射产生的亮信号来提供图像对比度。该方法无需荧光染色，样品也无需特殊切片处理(例如冷冻切片)，能快速、准确、高信背比地提供病理组织成像结果，为术中切缘评估提供了快速、准确的参考依据。

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