一种离心后细胞重悬仪器
成果类型:: 发明专利
发布时间: 2023-10-19 14:09:25
通过对周围科研人员观察及自身摸索,发现在洗涤过程重悬细胞时主要用了这2种方法:1.移液器吹打重悬细胞法,即在离心后,细胞沉在管底,倒掉上清加入少量缓冲液,通过移液器的反复吸和吹使细胞分散开来;2.晃动离心管重悬细胞法就是将离心后的上清倒掉,加入少量缓冲液,借抖动手腕的力晃动离心管使管内细胞分散开的方法。
离心后使细胞重悬贯穿细胞培养的多个过程,如细胞换液、细胞传代、细胞冻存、细胞复苏。1、细胞换液:(1)悬浮细胞:收集培养容器中的所有细胞悬液。离心后弃去上清。使用预热的完全培养基重悬,将细胞悬液接种到合适的培养容器中。(2)贴壁细胞:直接弃去培养容器中的上清,添加预热的完全培养基至原培养容器中。(3)半贴壁细胞:收集培养容器上清中的所有细胞,离心后弃去上清。使用预热的完全培养基重悬,接种至原培养容器中。2、细胞传代时对贴壁/半贴壁细胞进行收集,需要吸取细胞悬液,吹打培养容器底面数次,尽可能将细胞都吹打下来;细胞传代离心后去除上清,加入预热的完全培养基,轻柔吹打细胞沉淀,充分吹散、混匀。3、细胞冻存:离心后去除上清,用适量预冷的冻存液重悬细胞。4、细胞复苏:离心后去除上清,加入完全培养基,轻柔吹打细胞沉淀,充分吹散、混匀。如果吹打掌握不好,细胞很容易受到机械损伤和剪切力影响,导致细胞受损严重、状态变差或者直接死亡。机械损伤主要是指枪头刮擦、细胞间碰撞导致的细胞损伤,一般新手遇到这种问题比较多。枪头直接接触瓶底不仅会刮伤细胞,还可能划伤瓶底产生划痕。细胞完全培养基里都是有血清的,而血清中含有大量蛋白质,因此很容易出现气泡。剪切力是指如果培养基里有很多气泡,细胞在气泡与培养基之间,当气泡破碎时,细胞瞬间会受到强大的剪切力影响,很容易直接破碎。
因此急需一种能够解决新手因细胞重悬经验不足造成的细胞实验失败的问题,以及简化研究员细胞实验步骤的仪器。
本申请提供了一种离心后细胞重悬仪器,通过抽气部底端穿过培养瓶盖表面,并延伸至培养瓶内部,能够利用抽气部抽取培养瓶内部培养液,在通过固定在工作台表面的动力部与抽气部顶端固定连接,到达为抽气部提供动力的目的,同时可以设定适宜的吹打力度,此力度保证能够吹下或吹散培养瓶内底部的细胞,且不会对细胞造成损伤,吹打细胞时,抽气部(的抽液管中培养液不会打完,不会在重悬细胞时打入空气,避免气泡和剪切力的产生,同时可以减少研究员在细胞培养时的工作量,简化实验步骤且不影响实验结果。
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