科创中国

本发明提供参与桃黄酮醇生物合成调控的两个MYB转录因子PpMYB15和PpMYBF1,具有SEQ:NO.5和SEQ:NO.6所示的核苷酸序列.在它们的氨基酸序列中,均存在一个保守的SG7[K/R][R/x][R/K]xGRT[S/x][R/G]xx[M/x]K和SG72([W/x][L/x]LS)基序.两个MYB转录因子基因表达在果实发育过程中呈下调趋势,与黄酮醇的积累呈正向相关,可显著增强黄酮醇合成相关基因PpCHS,PpCHI,PpF3H和PpFLS1启动子活性,可强烈诱导烟草叶片黄酮醇的积累.本发明可用于植物黄酮醇生物合成的转录调控,并应用于植物黄酮醇含量和组分改良的基因工程中。

1.序列特征：ppmyb15和ppmybf1的编码序列全长分别为1596、1134个核苷酸，可分别编码一个含532和378个氨基酸的蛋白。其蛋白序列中含有保守的r2r3-myb结构域，在myb转录因子大家族中属于r2r3亚组。在ppmyb15和ppmybf1的蛋白序列中，均存在一个保守的sg7[k/r][r/x][r/k]xgrt[s/x][r/g]xx[m/x]k和sg7-2([w/x][l/x]ls)基序，该基序存在于许多参与黄酮醇生物合成调控的myb转录因子序列中。2.基因功能在桃果实的发育过程中，ppmyb15和ppmybf1的基因表达均呈下降趋势，与黄酮醇含量的减少呈良好正向相关性。ppmyb15和ppmybf1均可显著诱导黄酮醇合成关键基因ppfls1启动子活性，进而增强黄酮醇的积累。

桃(prunuspersica)系蔷薇科果树，原产中国，至今已有4000余年栽培历史，因果实风味浓郁而受广大消费者喜爱。我国桃的地理分布范围广，种植面积大且产量高，种质资源丰富，为桃天然产物的研究提供了重要基础。黄酮醇及其糖苷主要存在于果皮中，果肉中含量较少。其中，槲皮素、山柰酚和异鼠李素是组成桃果实黄酮醇糖苷的主要苷元。

黄酮醇具有消炎，抗肿瘤，抗氧化，保护神经系统，预防心血管疾病和糖尿病等医药学活性，且在植物生长发育和抵抗逆境等方面具有重要作用，包括抗紫外线、影响花粉发育、促进侧根形成、调控生长素转运、调节叶片气孔开度等。因此，富含黄酮醇的作物既可以作为膳食来源满足人体的摄入需求，也可用于生产药品、保健食品，具有广阔的开发应用前景。

李鲜，博士，教授，博士生导师，浙江大学求是青年学者。入选教育部“教育部新世纪人才支持计划”和“浙江省新世纪151 人才工程”，浙江省青年科技奖获得者，浙江大学食品制造与贮藏物流研究中心副主任，浙江省“园艺产品品质调控技术研创与应用”国际科技合作基地主任。从事果实品质生物学研究，重点围绕果实营养健康品质相关的植物次生代谢物质开展评价与代谢调控研究。先后主持国家自然科学基金项目多项，国家科技支撑计划项目课题，国家公益性行业科研专项课题，浙江省自然科学基金杰出青年项目、浙江省国际科技合作重点项目等科研项目。该发明团队其他成员为曹运琳、解林峰、邢梦云、徐昌杰。

本发明利用基因克隆、实时定量pcr、双荧光素酶系统技术和烟草瞬时表达技术，分离并鉴定出桃ppmyb15和ppmybf1对黄酮醇生物合成具有转录调控效应，可应用到植物黄酮醇生物合成的基因工程中，具有良好的市场效益。

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