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.一种基因定点突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：以重叠延伸PCR法对目标基因片段进行定点突变，获得含有突变位点的基因片段；将所述含有突变位点的基因片段与质粒载体连接，获得重组质粒。

本发明公开一种基因定点突变的方法，所述基因定点突变的方法包括以下步骤：以重叠延伸PCR法对目标基因片段进行定点突变，获得含有突变位点的基因片段；将所述含有突变位点的基因片段与质粒载体连接，获得重组质粒。本发明通过先对目标基因片段进行重叠延伸PCR扩增，以对目标基因片段进行定点突变，得到含有突变位点的基因片段，然后将该含有突变位点的基因片段与连入合适的载体，即可获得重组质粒，作为重叠延伸PCR法的扩展，避免了以重叠延伸PCR法直接对长基因进行全长基因扩增时，难以获得含有突变位点的扩增产物的问题，提供了一种适用于长基因定点突变的有效方法。

基因定点突变是常用的分子生物学技术，是蛋白质结构与功能研究的基础手段。目前基因定点突变主要采用基于聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的突变引入办法。最早开发出来的重叠延伸PCR(overlap extension PCR,OE-PCR)是基因突变的主要方法，近年来还发展出大引物法与滚环扩增法等定点突变方法。这些方法各有优劣，不同实验室在选择基因定点突变方法时有所偏好。

湖北文理学院（Hubei University of Arts and Science）是省属全日制普通本科高等院校，位于全国历史文化名城、湖北省域副中心城市—襄阳市，地处中华民族智慧化身诸葛亮的故居—古隆中。学校办学历史最早可以追溯到创办于1958年的襄阳师范专科学校；1966－1978年，武汉大学襄阳分校在此设立；1998年3月，襄阳师范高等专科学校、襄樊职业大学、襄樊教育学院合并组建襄樊学院；2000年7月，湖北省工艺美术学校整体并入；2012年2月，更名为湖北文理学院。截至2022年12月，学校设有二级学院18个，开设本科专业59个；拥有2个一级学科硕士学位授权点、11个硕士专业学位授权点；有教职工1675人，专任教师1168人；全日制在校生19000余人。

本发明提供的技术方案中，通过先对目标基因片段进行重叠延伸PCR扩增，以对目标基因片段进行定点突变，得到含有突变位点的基因片段，然后将该含有突变位点的基因片段与连入合适的载体，即可获得重组质粒，本基因定点突变的方法作为重叠延伸PCR法的扩展，避免了以重叠延伸PCR法直接对长基因进行全长基因扩增时，难以获得含有突变位点

本专利成果采用技术转让，技术入股，技术合作等成果转化方式，希望进一步实现该专利的有益效果，有兴趣皆可面议。