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食用油中脱氧核糖核酸的提取方法

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2023-07-14 16:50:01

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:天津市滨海新区| 宋学姮 | 2023-08-03 11:51:34
本发明涉及一种食用油中脱氧核糖核酸的提取方法,首先向食用油中加入脱氧核糖核酸提取液,超声乳化后分离出含脱氧核糖核酸的水相;然后向水相中加入脱氧核糖核酸沉淀剂,沉淀出脱氧核糖核酸。提取过程中通过低能量超声乳化富集样品中的DNA,缩短了样品的前处理时间,耗时短,提高了DNA的提取效率,并且避免了待检测样品之间的交叉污染,提取结果更准确可靠。
一种食用油中脱氧核糖核酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:向食用油中加入脱氧核糖核酸提取液,超声乳化后分离出含脱氧核糖核酸的水相;步骤二:向所述水相中加入脱氧核糖核酸沉淀剂,沉淀出所述脱氧核糖核酸;所述脱氧核糖核酸提取液为40~60mmol/L的乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸钠溶液、400~600mmol/L的氯化钠溶液、质量浓度为1.8%~2.5%的十二烷基磺酸钠溶液、质量浓度为0.8%~1.2%的聚乙烯吡咯烷酮溶液与pH为7.8~8.2、浓度为80~120mmol/L的三羟甲基氨基甲烷‑氯化氢溶液组成的混合溶液,所述脱氧核糖核酸提取液与所述食用油的体积比为1:8~12,所述超声功率为50~180瓦、频率为20~40kHz,超声处理时间为30秒~2分钟,所述脱氧核糖核酸沉淀剂为异丙醇与浓度为2.0~4.0mol/L的乙酸盐溶液的混合物,其中,异丙醇与乙酸盐溶液的体积比为1:4~8,所述步骤二中,加入脱氧核糖核酸沉淀剂之前,还包括如下步骤:向水相中加入食用油萃取剂对所述水相中残存的食用油进行萃取,充分混匀后进行离心处理,收集水相;其中,食用油萃取剂与萃取前的水相的体积比为1~2

 随着转基因技术的发展,各种转基因产品逐步进入人们的生活。2002年3月20日,中国开始实行《农业转基因生物标识管理办法》,规定国家对农业转基因生物实行检验检疫和标识制度。2004年,中国批准了耐除草剂转基因大豆(转基因抗农达大豆)的进口,各种转基因大豆相关的产品开始全面进入中国市场。截止2008年5月底,中国进口的转基因大豆达9.0 X IO6吨左右。转基因生物因其抗逆性好,产量较高,生产成本较低,具有较好的市场竞争性和应用前景。但转基因生物的广泛应用是否会对生态环境和人类自身的健康造成不良影响,至今仍无定论。目前各国相继出台各种政策,对转基因生物及其产品进行严格的标识管理和控制。因此,建立准确 的转基因检测方法对于落实相关政策和保护消费者的知情权和选择权有着非常重要的意义。

中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力,推动我国自主知识产权新工业的建立,成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统,由九个研究平台,国科大深圳先进技术学院,多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究,促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。

上述提取过程中通过低能量超声乳化富集样品中的DNA,缩短了样品的前处理时间,耗时短,提高了 DNA的提取效率,并且避免了待检测样品之间的交叉污染,提取结果更准确可靠。此外,提取过程中没有用到传统方法使用的剧毒物质,如正己烷、β_巯基乙醇等,实验过程更安全。同时,使用上述方法提取的DNA符合PCR定性检测的要求,对设备要求低,可广泛推广应用。

技术合作

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围`应以所附权利要求为准。