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本发明公开了一种生物巯基荧光探针，所述探针采用第一荧光基团做发射荧光的能量供体，第二荧光基团或淬灭基团做吸收荧光的能量受体，所述探针结构为R-S-S-R’，其中，R含有第一荧光基团，R’含有第二荧光基团或淬灭基团。本发明还提供了所述生物巯基荧光探针的制备方法和应用。本发明利用生物巯基探针自身荧光强度衰减或淬灭，提高了成像信噪比，同时，与巯基反应后的荧光稳定性高；本发明的荧光探针的制备方法简单，可在常温、常压、中性pH条件下进行。

一种生物巯基荧光探针，其特征在于，所述探针采用第一荧光基团做发射荧光的能量供体，第二荧光基团或淬灭基团做吸收荧光的能量受体，所述探针结构为R-S-S-R’，其中，R含有第一荧光基团，R’含有第二荧光基团或淬灭基团。本发明旨在解决上述现有技术中存在的问题，提高活体细胞成像信噪比，提高光 稳定性，本发明提供了一种生物巯基荧光探针，所述探针采用第一荧光基团做发射荧光的 能量供体，第二荧光基团或淬灭基团做吸收荧光的能量受体，所述探针结构为R-S-S-R'，其 中，R含有第一荧光基团，R'含有第二荧光基团或淬灭基团。

巯基（-SH)是细胞中化学活性最高的基团。在蛋白质中，巯基部分是与酶活性有关 的最具反应性的官能团，两个巯基脱氢形成二硫键（-s-s-)，使相邻多肽得以连接，对于维 持蛋白质完整结构十分重要。细胞中的巯基，尤其是谷胱甘肽（GHS)作为细胞内的亲核试 剂和还原试剂，能保护细胞不受缺氧、毒素、诱变、放射性及致癌物的侵害。大量的生物现象 均依赖于包括巯基在内的硫醇类物质，如氧化还原反应、甲基转移反应、二氧化碳固定反应 及辅酶A参与的反应等。游离的小分子巯基物质包括半胱氨酸（Cys)、高半胱氨酸（Hey)、还 原型谷胱甘肽（GSH)、二氢硫辛酸和辅酶A等。体内巯基分子的含量直接与多种疾病相关， 如癌症、帕金森综合症、心血管疾病等，Cys缺乏和儿童生长缓慢、浮肿、嗜睡和肝脏损伤等 病症相关，而血浆Hcy浓度升高则是动脉粥样硬化一个独立的风险因子。因此，发展快速、 灵敏、简便的检测巯基的方法在生物化学和临床化学中均具有重要意义。传统的巯基检测 方法有质谱法、高效液相色谱法（HPLC)、电化学法、分光光度法、比色法等，这些方法操作繁 琐，灵敏度低，且不适合生物样本中巯基的检测。

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本发明还提供了所述的生物巯基荧光探针在化学体系巯基检测中的应用。本发明的有益效果在于，生物巯基探针自身荧光强度衰减或淬灭，提高了成像信 噪比，同时，与巯基反应后的荧光稳定性高；本发明的荧光探针的制备方法简单，可在常温、 常压、中性PH条件下进行。

技术合作

以上所述的本发明实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何在本发明 的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的权利要求保护范 围之内。