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本发明涉及一种防治禽流感H5N1的重组杆状病毒疫苗的制备方法，具体涉及一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株及其制备方法，具体包含以下步骤：1)pS?ITRs?HA质粒的构建，2)pS?ITRs?HA质粒转化*** DH10 Bac，3)重组杆状病毒穿梭载体转染Sf9昆虫细胞，4)重组杆状病毒的扩增。制备获得的重组H5N1病毒疫苗株对免疫鸡的血清进行免疫检测，免疫鸡血清中IgG抗体的水平最高可达0.966，IL?2、IL?4和IFN?γ的浓度最高可分别达到89.67ng/L、80.21ng/L和64.24ng/L，以上结果表明重组杆状病毒疫苗可有效的刺激鸡体同时产生体液免疫和细胞免疫，为鸡群提供了双重免疫保护作用，本发明为基于杆状病毒的禽流感疫苗的研发奠定理论基础。

本发明的另一方面提供了一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株，其中在病毒基因中插入包含禽流感病毒血凝素HA基因的基因片段，所述HA基因片段的核苷酸序列为SEQIDNO：1；优选还包含启动子CMV的核苷酸序列为SEQIDNO：2、调控元件VSV-GED的核苷酸序列为SEQIDNO：3、调控元件WPRE的核苷酸序列为SEQIDNO：4和/或调控元件ITRs的核苷酸序列为SEQIDNO：5。 本发明再一方面还提供了一种重组H5N1病毒疫苗，其中包含根据权利要求1或2所述的表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株作为活性成分。

一、前言 随着对冠状动脉病变的病理生理学研究不断深入，我们不再仅仅停留在对冠状动脉解剖的认识上。新技术、新器械的不断推出，为介入医生制定治疗决策提供了越来越多的依据。近年来，血流动力学的指标越来越受到广泛的关注。FFR可以从功能的角度对狭窄病变进行评价，为证明心肌缺血提供了一种非常好的方法，被称为导管室里的“运动试验”。FFR在病变严重程度的判断、治疗策略的选择、PCI治疗的效果评价方面有重要的地位，为介入医生做出最佳的治疗方案提供了支持。 二、研究目的和意义 常规采用FFR 指导能改善PCI 的效果，在减少支架使用数量、减少对比剂用量、减少X 线曝光时间、减少手术相关费用的同时，显著降低主要不良心脏事件的发生风险。FFR值测定能有效弥补冠脉造影和IVUS的不足，对于临界病变的手术决策，判断“罪犯血管”具有重要作用，对于分支血管的血流储备测定是其独特的优势，使患者的手术选择更具有科学性和合理性，对提高术后疗效具有重要意义。 三、研究方法 1、项目在研期间完成了合同规定的技术指标。 2、采取有组织、有计划、有目的的进行宣讲、培训，会上布置，在临床工作中各个科室落实临床路径实施方面，检查、反馈实施情况。经过培训，医护人员对各个专科的临床路径理解、认识深刻。 3、实践分析：牡丹江心血管医院心内科成立于1987年，经过30余年的发展，现每年收治心脏病人5000余人次，治愈好转

黑龙江大学（Heilongjiang University），位于黑龙江省哈尔滨市，是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学，黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校，入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地，是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。

目前黑龙江省的大豆种植区域因大豆效益的下滑及栽培面积受玉米、水稻的挤压，逐渐向山区、半山区转移，该地区地块普遍排水不好，内涝严重，这就导致了大豆疫霉根腐病发生严重。大豆疫霉根腐病是黑龙江省大豆生产上的三大病害之一，其具有分布广泛、病原菌小种繁多、难以进行防治、危害大豆整个生育期等特点。目前仍以化学防治为主，甲霜灵在防治大豆根腐病中防效较好。但是化学防治中又以种子包衣处理或药剂拌种为主，这2种处理都存在持效期短、用药量大等问题，不能有效防治大豆中后期根腐病。氮肥的施用不当也会造成前期大豆疫霉根腐病的发生严重。本研究顺应国家"减肥减药"的发展趋势，以化学防治、生物防治、农业措施防治相结合的方式建立综合防治技术。本研究研发一种缓释甲霜灵颗粒剂，结合长效缓释尿素的施用，辅助以抗病品种的推广、生物药剂的应用、栽培技术的改进等措施对大豆疫霉根腐病进行高效、低毒的可持续防治。不仅响应了农业部将在全国范围内2020 年化肥、农药使用量零增长的号召，而且为农业持续发展、生态持续改善奠定了基础。

技术转让、合同、入股均可，具体资金双方协商，希望尽快落地实现产业化。