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一种人红细胞中利巴韦林快速检测前处理试剂盒及检测方法

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2023-05-25 09:10:12

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:“科创中国”黑龙江科技服务团| 马国范 | 2023-11-10 17:37:04
利巴韦林是一种人工合成的核苷类抗病毒药物,通过阻断病毒的再复制和扩散发挥广谱抗病毒作用,对于DNA病毒和RNA病毒均有效。临床上常用于治疗上呼吸道感染、肝炎、手足口病、水痘等由病毒感染引发的疾病。血液系统毒性是利巴韦林常见的不良反应,其中最主要的是溶血性贫血。人体内的利巴韦林会被平衡型核苷转运体(ENT)结合至细胞中,在细胞内磷酸化为多种磷酸盐,其中单磷酸利巴韦林和三磷酸利巴韦林被认为仍具备抗病毒活性。在有核细胞中,磷酸化利巴韦林会被去磷酸化酶去磷酸化,然后由ENT从细胞中消除。但红细胞作为无核细胞,缺乏去磷酸化酶,磷酸化利巴韦林会大量蓄积于红细胞内并消耗ATP,导致红细胞结构特征改变并溶血,这是利巴韦林诱发溶血性贫血的主要原因。研究表明,利巴韦林诱发溶血性贫血的风险与药物浓度密切相关,可通过调整利巴韦林用量降低该不良反应发生的风险,但调整给药剂量可能会影响利巴韦林的抗病毒效果,因此剂量的调整应以利巴韦林的治疗药物浓度监测结果为基准。
利巴韦林以磷酸盐的形式大量蓄积于红细胞中,浓度高于血浆几十倍,因此测定红细胞中的总利巴韦林对于评价人体内的利巴韦林水平更有价值。但现有检测方法存在利巴韦林与内源性物质难以分离、紫外响应值不高、灵敏度低的检测难点。红细胞内的利巴韦林以多种磷酸盐的形式存在,测定前需用磷酸酶进行孵育去磷酸化。现有文献中去磷酸化孵育方法需借助固相萃取(SPE)技术和氮吹技术对样本进行浓集除杂,方法复杂、成本高,且耗时较长。
免疫异常在再生障碍性贫血(AA) 发病因素中起着至关重要的作用。免疫抑制剂已经成为治疗AA 的主要药物。T 细胞亚群失衡,尤其CD4+ T辅助细胞的功能紊乱及细胞因子分泌失调是AA 患者外周血及骨髓淋巴细胞比例增高主要的发病机制。因此,本研究通过对AA 患者及正常人群中细胞因子的检测进一步阐明AA 的分子学水平发病机制。为临床治疗提供深层次理论依据,指导治本研究证明,AA 患者T 淋巴细胞与造血功能衰竭密切相关,AA 患者有明显的T 淋巴细胞亚群异常,表现为辅助性CD4+ 细胞减低,抑制性CD8+细胞升高,CD4+/CD8+ 降低或倒置,其中急性AA 比慢性AA 上述变化更为显著。细胞免疫功能紊乱是造成AA 发生和发展的关键环节;而CD4+ T 淋巴细胞作为体内最为重要的Th,是机体免疫功能调控的中心。当Th1/Th2 细胞发生极化时,Th 细胞不同亚群的平衡被打破、细胞免疫功能亢进,进而抑制造血干细胞的功能。两者均是免疫系统中重要的抑制因子,不仅可直接抑制效应T 细胞的功能,还能够抑制Th 细胞的分化和成熟;抑制造血功能、破坏造血组织。本研究提示AA 患者体内存在Th1 细胞和Th17 细胞的功能亢进,Th2 细胞的功能减弱,而且与病情严重程度有关。
哈尔滨医科大学坐落在北国冰城哈尔滨,是一所历史文化底蕴深厚的医学高等学府,由我国现代医学先驱伍连德博士于1926年创办的滨江医学专门学校(1938年更名为哈尔滨医科大学)和前身为中国共产党于1931年在江西瑞金创建的中国工农红军军医学校原兴山(现鹤岗市)中国医科大学第一、二分校组建而成。学校历经97年的发展建设,传承伍连德博士“赤诚爱国、自强创业”的精神,发扬中国工农红军军医学校“政治坚定、技术优良”的光荣传统,秉承“木直中绳、博学载医”的校训,综合实力不断增强,具有相当的发展规模和鲜明的办学特色。学校是部委省共建大学、黑龙江省国内一流大学建设高校、中俄医科大学联盟中方牵头单位、国家理科基础科学研究与教学人才培养基地、教育部首批试办七年制高等医学教育院校、教育部高水平公共卫生学院建设高校。
我国是慢性肝炎大国,同时有大量过度饮酒人群,长期作用均会导致患者出现肝硬化,其合并门脉高压引起食管胃底静脉曲张破裂出血是肝硬化晚期病人常见死亡原因。食管胃底静脉曲张是肝硬化失代偿期的常见症状,因肝硬化患者门静脉压力增加所致,随着病情进展,食管胃底静脉曲张破裂出血则成为消化系统危急重症。对于失代偿期肝硬化患者,食管胃底静脉曲张破裂出血是导致患者死亡的一个重要因素,很多患者在短时间内会出现再出血,导致肝功能短时间内衰减,患者无法耐受与手术;另一方面,外科手术会给患者造成较大创伤,因此这类患者治疗过程中面临较高的风险。有资料报道,食管胃底静脉曲张破裂出血进展快,出血量大,首次发病者病死率高达 50% 。肝硬化患者每年新增食管胃底静脉曲张率为 5%,20% ~ 30% 的患者合并上消化道出血,发病人群呈上升趋势。而如何在短时间内控制出血,延缓病情进展是当前挽救患者生命安全的关键。内镜技术是目前治疗食管胃底静脉曲张破裂出血的常用手段,包括内镜下套扎、内镜下硬化剂注射、内镜下曲张静脉栓塞等。 目前国内外主要采取胃镜下套扎,硬化或组织胶注射治疗。但此操作风险大(术中术后出血,尤其是套扎术后脱圈大出血,可能有生命危险),不彻底,需反复多次治疗,费用高。临床上需要一种更安全有效的治疗方法。 通过大量临床经验及总结,结合门静脉血管成像,大部分食管静脉曲张都存在胃内来源血管,即存在多支隐秘来源血管
技术转让、合同、入股均可,具体资金双方协商,希望尽快落地实现产业化。