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一种生化制剂TMB的合成方法，包括如下步骤：1、2,2′,6,6′-偶氮四甲苯胺-N,N-二氧化物的合成：在乙醚和水的混合溶剂中，加入2,6-二甲基苯胺和催化剂钨酸钠，搅拌均匀，降温至20～30℃，保温并滴加双氧水，其中过氧化氢与2,6-二甲基苯胺的摩尔比为1:3，滴完后继续搅拌反应7～9小时，反应完成后，降温到0～5℃，析出沉淀，过滤，洗涤，干燥，得到2,2′,6,6′-偶氮四甲苯胺-N,N-二氧化物；2、2,2′,6,6′-四甲基二苯肼的合成：在甲醇中，加入2,2′,6,6′-偶氮四甲苯胺-N,N-二氧化物，搅拌溶解，降至室温，缓慢滴加硫氢化钠和硫代硫酸钠的混合溶液，2,2′,6,6′-偶氮四甲苯胺-N,N-二氧化物、硫氢化钠和硫代硫酸钠的摩尔比为1：3～5：0.4～0.5，滴完后升温至70～75℃，回流2-3h，回流过程中控制体系的pH为9～9.4，回流结束后，常压蒸馏回收甲醇，降温析晶，过滤，用水洗涤滤饼至呈中性，干燥，得到2,2′,6,6′-甲苯基二苯肼；

本发明公开了一种生化制剂TMB的合成方法，包括如下步骤：1、2,2′,6,6′?偶氮四甲苯胺?N,N?二氧化物的合成；2、2,2′,6,6′?四甲基二苯肼的合成；3、TMB·(1/2)H2SO4的合成；4、TMB·2HCl的制备；5、TMB的制备。该方法合成路线简单，原料便宜易得，合成成本低，而且收率高。

TMB中文名是3,3',5,5'-四甲基联苯胺，其结构式为：

TMB主要用于生物化学领域，之前由于其用量并不大，其合成方法的专利并不多。进年来，由于生物制药发展迅猛，其用量逐渐增大，因此其合成方法的专利不断增多。

德国专利DE2540740公开了一种TMB的合成方法：4-溴代-2,6-二甲苯胺在Pd/C催化剂、季铵盐和甲酸钠的作用下缩合成TMB，该方法是目前合成TMB最好的方法，收率达63％。

中国专利CN1056304公开了一种TMB的合成方法：以2,6-二甲基苯胺为原料用赤血盐氧化为偶氮化合物然后用氯化铵溶液加锌粉还原为联苯胺：最后在盐酸作用下重排为TMB，但该方法无实验数据支撑，无操作性。

苏联专利Ru2086536公开了一种TMB的合成方法：首先将2,6-二甲基苯胺经双氧水氧化为偶氮化合物然后用氯化铵溶液加锌粉还原为联苯胺：

然后再用硫酸重排为TMB，该方法收率45.4％，同样无实验数据支撑，无操作性。而且2,6-二甲基苯胺的氧化是个很复杂的过程，采用双氧水氧化需催化剂提高反应的选择性，否则的话，除了得到还会产生和/或除了2,6-二甲基苯胺的氧化很复杂，还原为联苯胺也非易事，重排更是个复杂过程，远非CN1056304、Ru2086536报道那样简单。

综上所述，上述三种TMB合成方法，以DE2540740公开的合成方法要成熟一些，但由于使用溴素及Pd/C，成本高，而CN1056304及Ru2086536只是简述了一下原理，缺乏数据支撑，无操作性，因此无使用价值。

荆楚理工学院（Jingchu University of Technology）简称“荆楚理工”，位于湖北省荆门市，学院于2007年3月经教育部批准由初创于1956年的沙洋师范高等专科学校和始建于1984年的荆门职业技术学院合并组建而成， [2] 是一所省属公办全日制普通本科高等学校，为湖北省首批地方本科院校转型发展试点学校、“湖北省2011计划”首批牵头高校，“实行“省市（荆门）共建、以省为主”的管理体制。 截至2022年3月，学院占地面积2400余亩，校舍建筑面积35.87余万平方米；设有16个教学学院（部），开设本科专业43个，专科专业15个，涵盖理、工、农、医、文、教、管、艺等8大学科门类；在编教职工1134人，有教授、副教授等高级职称人员342人，博士、硕士678人。享受国务院及湖北省政府特殊津贴的专家4人；有全日制普通在校生19615人，其中本科生13998人。

与现有技术相比，本发明的优点和有益效果在于：

1、在合成2,2′,6,6′-偶氮四甲苯胺-N,N-二氧化物过程中，采用钨酸钠作催化剂，双氧水氧化偶合，大幅度提高了此合成反应的选择性和收率，收率高达98％。

2、在合成2,2′,6,6′-四甲基二苯肼过程中，采用硫氢化钠与硫代硫酸钠的混合溶液进行反应，硫化钠与硫代硫酸钠的价格便宜，反应条件简单易控制，操作方便，合成成本低，而且收率高，收率高达80％。

3、该方法采用硫酸使2,2′,6,6′-四甲基二苯肼重排，2,2′,6,6′-四甲基二苯肼完全重排，再采用盐酸成盐，收率高。

4、在甲醇溶液中和游离TMB，热滤出氯化钠，除盐彻底，降温结晶，避免氯化钠析出影响含量，收率高。

本专利成果采用技术转让，技术入股，技术合作等成果转化方式，希望进一步实现该专利的有益效果，有兴趣皆可面议。