本发明涉及一种巯基化胆固醇修饰的mPEG接枝壳聚糖,所述接枝壳聚糖包括:作为母体骨架的壳聚糖;接枝在壳聚糖的第一葡萄糖重复单元的氨基上的甲氧基聚乙二醇单元;接枝在壳聚糖的第二葡萄糖重复单元的氨基上的胆固醇;接枝在壳聚糖的第三葡萄糖重复单元的氨基上的含巯基基团。本发明还涉及所述接枝壳聚糖的制备方法及其在制备止血海绵中的应用。本发明以天然大分子壳聚糖为基本原料,所制得接枝壳聚糖具有强吸水性和粘膜粘附性等特点,将其作为止血海绵后具有止血速度快和抗菌效果好等优点,而且能够加速破损细胞修复和再生和伤口愈合。
(1)利用胆固醇和丁二酸酐合成丁二酸单胆固醇酯;
(2)利用壳聚糖、mPEG、冰醋酸和甲醛合成mPEG接枝壳聚糖;
(3)利用所述丁二酸单胆固醇酯和所述mPEG接枝壳聚糖合成胆固醇修饰的mPEG接枝壳聚糖;
(4)利用巯基化试剂和所述胆固醇修饰的mPEG接枝壳聚糖合成巯基化胆固醇修饰的mPEG接枝壳聚糖。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:
在步骤(1)中,将胆固醇和丁二酸酐溶于第一反应溶剂中,以吡啶为催化剂,在25~65℃条件下搅拌24~96h进行反应,制得丁二酸单胆固醇酯;
在步骤(2)中,将含壳聚糖、mPEG和冰醋酸溶于第二反应溶剂中,在10~50℃条件下搅拌10~120min后,再加入甲醛水溶液,在10~50℃条件下搅拌1~5h进行反应,制得mPEG接枝壳聚糖;
该项目列入2018年齐齐哈尔市科技局社会发展指令性计划。其编号为SFGG-201757 。
本课题研究中采取了在有内源AGR2表达的胰腺癌CFPAC-1细胞中,通过慢病毒介导的短发夹RNA基因沉默技术,建立两组人源AGR2基因沉默的CFPAC-1稳定细胞系,导致AGR2在细胞中的表达显著降低,以进一步开展其对胰腺癌细胞的生物学特性进行研究。这种技术方案是国内外常用的研究基因在细胞内生物学功能的常用方法,具体原理:通过慢病毒感染宿主细胞时,可将携带的外源基因随机、稳定地整合入宿主细胞基因组中,实现目的基因稳定、长期的表达,非常适合于基因过表达稳定细胞株的建立和基因功能研究。
同时本课题为验收细胞系是否构建成功使用了免疫荧光技术和western blotting技术,并用流式细胞术共染PI和Annexin V评价细胞凋亡水平研究AGR2对胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡的影响,这些技术都是国内外常用的、公认的经典实验,用于研究肿瘤生物学、细胞生物学和分子生物学领域的研究。
胰腺癌的癌变过程是多基因、多阶段、多因素共同参与的复杂的生物学过程,伴随有致癌基因的激活,抑癌基因的丢失与突变等。但是胰腺癌发生发展的分子机制仍然还不是十分清楚,因此深入探究胰腺癌发生发展的生物学机制,对提高胰腺癌的早期诊断率及减少术后复发、转移是非常必要的,这将在很大程度上改善对这一恶性肿瘤的生存率。
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雷锋团队是由哈尔滨师范大学14级政治与行政学院的关明贺同学于2015年9月1日建立的学生自主创立的创业团队。在黑龙江福成科技有限公司的赞助下,旨在为江北的大学生服务,让大学生过上更好的大学生活。自创立以来,雷锋团队本着为同学服务的宗旨,解决大学生生活问题为核心,为大学生提供广大的创业机会。创立后不久已成为哈尔滨江北十余所大学院校人数最多、最有号召力和影响力的学生团队组织。
多数学者认为非酒精性脂肪性肝病存在胰岛素抵抗,并认为胰岛素抵抗是非酒精性脂肪性肝病的发病机制,但具体机制仍未能阐明。GLUT-4与脂联素的表达与胰岛素抵抗有何联系,目前国内鲜有报道。目前有研究脂联素或GLUT-4在非酒精性脂肪肝中的作用,但是两者联合检测在非酒精性脂肪中作用未有报道。近年来,随着人们对NAFLD认识的加深,NAFLD的危害性逐渐被发现,在不进行干预的情况下,NAFLD有发展为NASH甚至进一步发展为脂肪性肝硬化、肝癌的可能。IR是NAFLD发病的中心环节,在“二次打击”理论中,IR本身是第一次打击的起因,又参与了第二次打击,因此对IR的进程施加影响,则有可能延缓、抑制NAFLD的病程,甚至使NAFLD发生逆转,使治愈NAFLD成为可能。
本研究显示GLUT-4、脂联素两种因子对NAFLD的病程进展具有推动作用,这让我们对NAFLD有了新的认识。
本实验主要通过测定NAFLD大鼠肝组织中GLUT-4的表达情况,并与正常对照组大鼠肝组织中GLUT-4的表达情况相比较,同时测定两组大鼠血清中的脂联素含量。旨在探索GLUT-4及脂联素在NAFLD的发生及进展过程中的作用机制及相互之间的关系,在非酒精性脂肪肝病不同病变程度中两者的变化与关系,为NAFLD的预防与治疗提供科学依据。
技术转让、合同、入股均可,具体资金双方协商,希望尽快落地实现产业化。