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本发明提供了一种自杀基因纳米胶束，包括两亲性三嵌段聚合物和自杀基因，所述自杀基因纳米胶束为具有三层结构的复合体，所述聚亮氨酸构成所述复合体的内层，所述聚赖氨酸构成所述复合体的中间层，所述氨基聚乙二醇羧酸构成所述复合体的外层；其中，所述复合体的中间层还包括自杀基因质粒，所述自杀基因质粒分散在中间层的所述聚赖氨酸中。该自杀基因纳米胶束采用生物相容性和稳定性较好的三嵌段聚合物为载体材料制备自杀基因载体，该载体能很好的负载自杀基因质粒，转染效率较高，能提高自杀基因质粒在体内的稳定性，延长自杀基因质粒在体内的半衰期；本发明还提供了一种自杀基因纳米胶束的制备方法和应用。

一种自杀基因纳米胶束，包括两亲性三嵌段聚合物，所述两亲性三嵌段聚合物为线性高分子化合物，包括为氨基聚乙二醇羧酸、聚赖氨酸和聚异亮氨酸，所述聚赖氨酸的一端通过酰胺键与所述氨基聚乙二醇羧酸相连，另一端通过肽键与所述聚亮氨酸相连，其特征在于，所述自杀基因纳米胶束为具有三层结构的复合体，所述聚亮氨酸构成所述复合体的内层，所述氨基聚乙二醇羧酸构成所述复合体的外层；所述复合体的中间层包括所述聚赖氨酸，还包括自杀基因质粒，所述自杀基因质粒分散在中间层的所述聚赖氨酸中；所述两亲性三嵌段聚合物和自杀基因质粒的质量比为1～20:1。

自杀基因(suicide gene)治疗，是指将某些病毒或细菌的基因导入靶细胞中，其表达的酶可催化无毒的药物前体转变为细胞毒物质，从而导致携带该基因的受体细胞被杀死。这类基因称为自杀基因，又称药物敏感性基因。目前，具有较好临床应用前景的自杀基因主要有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-tk)，胞嘧啶脱氨酶基因(E,colicytocine deaminase,CD)。但是由于自杀基因本身穿透细胞膜的能力极差，且易被血清中的酶迅速降解而难以表达。

中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。

本发明提供了的自杀基因纳米胶束及其制备方法和应用具有如下有益效果：

(1)本发明提供的自杀基因纳米胶束由通过静电吸附或物理吸附的作用包覆自杀基因质粒，包封率较高，形成的纳米粒比较稳定，能提高自杀基因质粒在体内的半衰期；

(2)本发明提供的自杀基因纳米胶束能提高转染效率和自杀基因质粒的表达效率，且细胞毒性很小，使用更加安全；

(3)本发明提供的自杀基因纳米胶束的制备方法简单、低成本；

(4)本发明提供的自杀基因纳米胶束可用于预防或治疗卵巢癌药物免疫佐剂药物。

技术合作

裸露自杀基因转染的细胞无荧光蛋白表达，阳性对照有荧光蛋白表达，说明实验结果可信。图3为自杀基因纳米胶束的细胞转染效率的流式定量检测结果图，其中，DNA为裸露自杀基因对照组，DNA-lipo为阳性对照组，DNA-NPs为自杀基因纳米胶束实验组。如图3所示，自杀基因纳米胶束的转染效率约为14％，而裸露自杀基因效率约为0。由图2和图3可知，本发明提供的自杀基因纳米胶束转染的细胞有荧光蛋白表达，且表达荧光蛋白的细胞比例较高；说明本发明提供的自杀基因纳米胶束具有较高的转染效率。