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快速扩增RNA聚合酶

成果类型:: 发明专利

发布时间: 2022-11-23 08:48:15

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:“科创中国”黑龙江产业振兴区域科技服务团| 张书悦 | 2022-11-24 10:13:19
利用荧光染料检测信号,随着双链DNA不断的扩增,信号不断的增加。当这个反应在 65℃下进行时。需要选择合适的聚合酶来进行实验。例如,Bst DNA polymerase具有反转录的活性可以一步法检测RNA。整个过程可以在一个恒定的温度(低于双链的熔解温度)下进行。从而,避免了传统的热变性的过程。在恒温的条件下,上游引物会与双链DNA 中的变性区域的单链杂交并且在聚合酶的作用下不断向前延伸。引物P1 延伸的产物由于会自发的构像发生变化。
在该方法中采用Mg2+,其对扩增的特异性以及产生的产物有明显的影响。利用SEA检测不同长度的靶标。通过比对荧光扩增曲线中的时间阈值(Tt)表明,将此方法用于扩增45bp的靶标长度时的Tt值是最小的,即扩增效率是最高的。

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