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本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体，以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒，属于免疫学技术领域和瘦肉精检测技术领域。本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体，以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒，属于免疫学【技术领域】和瘦肉精检测【技术领域】。本发明所述的抗苯乙醇胺A单克隆抗体的效价高达1：409600，亲和常数为8.8×108L/mol，与β-激动剂类似物的交叉反应率CR(％)均小于0.1％，半数抑制率IC50为0.18ng/ml。以该抗体为基础的试剂盒灵敏度高、稳定性好、精密度高，可用于苯乙醇胺A残留的快速检测。

本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体，以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、 含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒，属于免疫学【技术领域】和瘦肉精检测技术领 域。苯乙醇胺A(PhenylethanolamineA,PEAA)俗称克伦巴胺，化学结构式为 2-[4-(4_硝基苯基）丁基-2-羟基氨基]-1-甲氧基苯乙醇，英文名称2-(4-(nit rophenyl)butan-2-ylamino) _1_(4-me-thoxyphenyl)ethanol,分子式为C19H24N204,化学 结构式如下：

以该抗体为基础的试剂盒灵敏度高、稳定性好、精密度高，可用于苯乙醇胺A残留的快速检测。

一种抗苯乙醇胺A单克隆抗体，其特征在于，该单克隆抗体由保藏号为CCTCC N0:C2014222的杂交瘤细胞株PEAA-3B5产生。

2. 根据权利要求1所述的抗苯乙醇胺A单克隆抗体，其特征在于，该抗苯乙醇胺A单克 隆抗体的亚型为IgGjK)。

3. 如权利要求1或2所述的苯乙醇胺A单克隆抗体在用于配制检测生物样品中的苯乙 醇胺A残留的非诊断目的试剂盒中的应用。

4. 一种产生如权利要求1或2所述抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株 PEAA-3B5,其特征在于，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO :C2014222。

5. -种检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有如权利要求1所述的苯乙醇胺A单克隆 抗体。

6. 根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有经辣根过氧化物 酶、黑曲霉葡萄糖氧化酶、小牛肠碱性磷酸酶或大肠杆菌P-D-半乳糖苷酶标记的苯乙醇 胺A单克隆抗体。

7. 根据权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还含有用苯乙醇胺A和 载体蛋白的偶联物PEAA-0VA预包被的检测板、苯乙醇胺A标准品液、显色液和洗涤液。

8. -种制备权利要求1或2所述的苯乙醇胺A单克隆抗体的方法，其特征在于，包括如 下步骤： ⑴将苯乙醇胺A与牛血清白蛋白或鸡卵白蛋白采用重氮化法连接，制备人工抗原； ⑵用步骤⑴所得抗原免疫小鼠，免疫后小鼠断尾取血，检测该血清的效价和抑制，选取 免疫效果好的小鼠； ⑶取步骤(2)所述免疫效果好的小鼠的脾细胞，使其与小鼠骨髓瘤细胞融合，以选择性 培养基培养所得融合细胞，测定抗体的效价和抑制，筛选阳性孔，通过有限稀释法对阳性孔 进行亚克隆，直至建立单一抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株； ⑷将步骤⑶中所得的单一抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株注入石蜡油致敏 的同系小鼠腹腔，制备腹水； (5)将步骤⑷制备的腹水经过辛酸硫酸铵和Protein G亲和层析柱纯化，获得抗苯乙醇 胺A的单克隆抗体。

河北省科学院成立于1978年，是河北省政府直属的综合性自然科学研究与技术开发机构，全院占地13.8万m2，建筑面积8.3万m2，总资产1.76亿元，固定资产1.29亿元。院机关设有8个处室，下辖地理科学研究所、应用数学研究所、生物研究所、能源研究所、自动化研究所、激光研究所、微生物研究所和机电一体化中试基地（机电研究所）等8个研究开发单位。全院共有职工700余人，专业技术人员530余人，高级职称人员170余人，博士31人，硕士98人，博士生导师14人，硕士生导师18人，享受国务院特殊津贴专家2人，享受河北省政府特殊津贴专家10人，河北省“百人计划”（省政府特聘专家）2人，入选河北省“三三三人才工程”第二层次人选15人、第三层次人选41人。 近年来，省科学院先后承担了“863”、“973”等国家、省部级重点项目和基金课题430余项，取得各类科研成果 1480余项，获省部级以上奖励697项，授权发明专利100项、软件著作权85项。

本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体，以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒，属于免疫学【技术领域】和瘦肉精检测【技术领域】。本发明所述的抗苯乙醇胺A单克隆抗体的效价高达1：409600，亲和常数为8.8×108L/mol，与β-激动剂类似物的交叉反应率CR(％)均小于0.1％，半数抑制率IC50为0.18ng/ml。以该抗体为基础的试剂盒灵敏度高、稳定性好、精密度高，可用于苯乙醇胺A残留的快速检测。

本发明涉及抗苯乙醇胺A单克隆抗体，以及产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株、 含有该抗苯乙醇胺A单克隆抗体的检测试剂盒，属于免疫学【技术领域】和瘦肉精检测技术领 域。

[0002] 苯乙醇胺A(PhenylethanolamineA,PEAA)俗称克伦巴胺，化学结构式为 2-[4-(4_硝基苯基）丁基-2-羟基氨基]-1-甲氧基苯乙醇，英文名称2-(4-