科创中国

本发明公开了一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn 2位脂肪酸组成的方法,其包括,利用脂肪酶Lipozyme 435结合超声辅助醇解富含多不饱和脂肪酸甘三酯;将得到的超声辅助酶法醇解产物经高效液相进行分离,得到sn 2单甘油酯并收集;将所得的sn 2单甘油酯进行甲酯化衍生处理,获取衍生物;气相色谱检测所得的衍生产物,测定甘油三酯中sn 2位脂肪酸的组成及含量

作为本发明所述一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸组成的方法的优选方案，其中：在利用脂肪酶Lipozyme 435结合超声辅助醇解富含多不饱和脂肪酸甘三酯之后，将得到的超声辅助酶法醇解产物经高效液相进行分离，得到sn-2单甘油酯并收集之前，还包括，先进油酸sn-2单甘油酯标样，记下sn-2单甘油酯的保留时间，作为判定单甘油酯的保留时间以进行高效液相分离。作为本发明所述一种测定多不饱和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸组成的方法的优选方案，其中：所述将所得的sn-2单甘油酯进行甲酯化衍生处理，获取衍生物是将sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹仪将溶剂挥发掉，并向离心管中加入体积比为2:1的正己烷和1.5mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液，将混合液混匀1min，5000r/min离心3min，收集上清液得到衍生物。

多不饱和脂肪酸(PUFA)指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂肪酸。通常分为omega-3和omega-6，在多不饱合脂肪酸分子中，距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为omega-3；在第六个碳原子上的，则称为omega-6。多不饱和脂肪酸在人体中具有许多特殊的生理功能。其中，DHA和ARA是人体大脑和视神经发育的重要物质，尤其是对提高孕期和婴儿期智力和视力具有重要作用，因此，普遍添加于婴幼儿配方中。此外，EPA和DHA对防治心血管疾病、糖尿病和肿瘤等方面也发挥着积极的功效。

目前，深海鱼油、微藻油和微生物油脂是Omega-3和Omega-6系列多不饱和脂肪酸的主要来源。富含多不饱和脂肪酸的油脂中甘三酯是其主要成分，其含量占总脂类的90％以上。甘油三酯是由一分子甘油和三分子脂肪酸通过酯化反应缩合而成的，酰基可位于sn-2和sn-1,3，其化学结构式如下：

由于多不饱和脂肪酸来源、脂肪酸种类和含量，碳链长短、双键数目、双键位置的不同而具有不同的理化和流变性质，尤其是多不饱和脂肪酸在甘油三酯中位置分布影响其消化，吸收，代谢及营养价值。富含多不饱和脂肪酸甘三酯的油脂进入人体内，经胰脂酶部分水解生成sn-1,3游离脂肪酸和sn-2单甘酯，与胆盐形成乳糜微粒而被小肠粘膜吸收。然而，两者的代谢途径不同，游离多不饱和脂肪酸一部分被运往肝脏进行β-氧化为机体提供能量，而另一部分游离的长链脂肪酸易与Ca2+和Mg2+形成钙镁皂，引起便秘，同时造成钙质流失，不能发挥其应有的生理功能；而sn-2单甘酯则重新酯化，通过淋巴转运输送至脑部和眼部可以充分发挥其生理功效。因此，准确测定多不饱和脂肪酸在甘三酯中的位置分布是评价其营养价值的重要指标。本发明在检测技术领域有着广泛的应用前景。

发明人：王兴国 张惠君 金青哲 刘睿杰 常明 黄健花

江南大学是教育部直属、国家“211工程”重点建设高校和“双一流”建设高校。学校具有悠久的办学历史、厚重的文化积淀，源起1902年创建的三江师范学堂，历经国立中央大学、南京大学等发展时期；1958年南京工学院食品工业系整建制东迁无锡独立建校，成立无锡轻工业学院；1962年无锡纺织工学院并入无锡轻工业学院；1995年更名为无锡轻工大学；2001年无锡轻工大学、江南学院、无锡教育学院合并组建江南大学；2003年东华大学无锡校区并入江南大学。

本发明首先利用南极假丝酵母源脂肪酶(Lipozyme 435)结合超声辅助的醇解反应富含多不饱和脂肪酸甘三酯，该酶在醇解反应中具有很强的sn-1,3特异性，适用于富含多不饱和脂肪酸甘三酯的sn-1,3特异性酶促醇解反应，同时结合超声波辅助提高了醇解反应速率。因此，本发明提供的富含多不饱和脂肪酸甘三酯超声辅助醇解反应及sn-2单甘酯分离和甘三酯sn-2位脂肪酸组成的测定方法，准确度和灵敏度高、重现性好、稳定性强。

科技成果只有通过实施开发应用，使其转化为生产力，才能取得经济效益和社会效益。成果方目标是将科技成果转化为现实生产力，期待有意愿的企业或合作单位进行合作推广或者进行产品生产。考虑合作转化、许可+合作等转化方式与企业、科学技术研究开发机构和其他组织建立合作关系。