肿瘤标识物CA19-9与CA125快速检测用免疫双光子荧光标记试剂盒
成果类型:: 新技术
发布时间: 2022-10-14 11:33:31
糖链抗原CA19-9 (Carbohydrate antigen 19-9,简称Ag) 是一种与胰腺癌、胆囊癌、结肠癌和胃癌相关的肿瘤标识物,其抗体为Ab19-9(简称Ab)。CA19-9测定广泛用于结肠直肠癌 胃癌、胰癌、肝细胞癌 肺癌、乳癌的临床监测与诊断。糖链抗原CA125(Carbohydrate antigen 125,简称Ag)是一种与卵巢癌、输卵管腺癌、子宫内膜癌和宫颈癌相关的肿瘤标识物,其抗体为Ab125(简称Ab)。因此,快速、专一、可靠地检测体内肿瘤标识物CA19-9和CA125,对于早期肿瘤与癌症的诊治及预警具有十分重要的理论和现实意义。
对于肿瘤标识物(CA19-9和CA125)的检测,报道的很多,但这些方法都不具备专一性,灵敏度及稳定性差,且操作繁琐费时,检测试样限于血液与外周血。直接免疫荧光法特异性强、灵敏度高、速度快、无放射性污染(与放射免疫法相比)、操作简便、便于推广。单光子荧光激发波长一般在350~560 nm, 易产生光致毒与光漂白;而双光子荧光采用800~1100 nm 的高强度激光作为激发光源,不仅能克服单光子荧光的缺点,还能实现深层暗场成像与定点激发,避免组织自发荧光干扰以及降低组织吸光系数,从而显著地提高成像的清晰度、检测的灵敏度与分辨率。
基于双光子荧光机制用近红外激光(740 nm)激发LP-Ab·Ag,利用LP-Ab·Ag的双光子荧光首次实现对肿瘤标识物(CA19-9和CA125)的高清晰度、高灵敏度与高分辨率的量化检测和实时动态成像,并首次制成简单便捷的用于肿瘤标识物检测的双光子荧光标记试剂盒,能方便快速地进行门诊化验与筛选。本方法不但能准确诊断早期肿瘤发生与否,而且能够在肿瘤发生和发展过程中对某些关键单分子事件和癌细胞转移过程实施动态监测,这为揭示癌症发生、发展及转移机制提供了锐利工具。
黄池宝,男,1969年9月生,湖南汨罗人,中共党员,博士,教授,2010年1月至2011年12月在湘潭大学做博士后研究。现为遵义师范学院化学化工学院教师、中国化工学会精细化工专业委员会常务委员。曾伯平,男,汉族,湖南新化人,中共党员,博士研究生,理学博士,教授。曾担任湖南师范大学、中南林业科技大学、上海师范大学兼职硕士生导师,中国水产学会资深会员、中国水产学会鱼病研究委员会委员、农业部科技专家、湖南省普通高校学科带头人、湖南省第三批跨世纪学术和技术带头人,湖南省高校"动物学"重点实验室主任、湖南省青年骨干教师,常德市第三届"有突出贡献专家"、第四届"常德科技之星"。
免疫双光子荧光标记试剂盒的组成:双光子荧光标记抗体LP-Ab(10 μmol/L),硝酸纤维素膜、封闭缓冲液(20 mmol/L pH 7.4 PBS + 0.5 %(W/V) BSA)和洗涤缓冲液(含0.05 %吐温20的50 mmol/L PBS, pH 7.4)。 试剂盒由韶关市金粤精细化工有限公司生产上市,2016与2017年度实现销售收入与利润分别为3350、3953和732、842万元。试剂盒经韶关市农产品质量安全监督检验测试中心使用后,反映可大幅度降低检测费用(与进口检测试剂相比),且无细胞毒性,值得推广。 试剂盒经韶关市第一人民医院使用后,反映能应用于大规模常规体检与门诊化验,且无细胞毒性,值得大力推广。
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