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一种液化沙雷氏菌及其转化合成洋茉莉醛的方法

成果类型:: 发明专利,新品种,新技术

发布时间: 2022-09-28 11:47:42

科技成果产业化落地方案
方案提交机构:成果发布人| 陈曦 | 2022-09-28 11:47:42

本发明公开了一种液化沙雷氏菌及其转化合成洋茉莉醛的方法,属于生物技术领域。本发明从土壤中筛选分离到一株可以转化黄樟油素为底物原料合成洋茉莉醛的新菌株ZMT 1,该菌经鉴定为液化沙雷氏菌,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2016170。该菌株种子培养物接种于发酵培养基中,需氧生长24 36h,然后添加0.5~3g/L底物转化24 48h,产洋茉莉醛160 524mg/L。本发明首次报道了液化沙雷氏菌用于合成洋茉莉醛,提供了一种微生物转化法合成洋茉莉醛的方法。

所述液化沙雷氏菌ZMT-1在基础无机盐培养基平板上,菌落呈浅白色,半透明的,粘稠的,中间凸起,边缘整齐,直径1mm左右。电镜照片表明,菌体细胞为直杆状,端圆,不产生芽孢,无荚膜,有鞭毛;大小为(0.5~0.8)μm×(0.5-2.0)μm。兼性需氧,革兰氏阴性,能够在温度范围10~37℃、pH 4~9、含有0%~4%的NaCl的条件下生长;能够较好利用葡萄糖、蔗糖、甘露醇、果糖、麦芽糖、甘油;能够利用铵盐、硝酸盐以及酵母粉、蛋白胨等复杂氮源。

洋茉莉醛(Heliotropin)又称胡椒醛(Piperonal),化学名称为3,4-二氧亚甲基苯甲醛,分子式C8H6O3,分子量150.14。在19世纪中叶,***和W.***在研究生物碱胡椒碱的水解时发现该物质。洋茉莉醛广泛存在于香精油、紫罗兰、樟脑木以及刺槐中,具有类似葵花和樱桃的香气,其口味是有力的甜花香,辛香和微苦,是世界上最主要的且最吸引人的香料之一。

在香料行业中,可以利用洋茉莉醛为起始原料制备新洋茉莉醛,胡椒基丙酮,洋茉莉腈等,这些物质广泛的应用于香水等化妆品中;在医药上,可以利用洋茉莉醛为原料制备抗高血压、脑血管疾病以及抗癌药物的中间体;在农业上,可以利用洋茉莉醛为起始原料制备增效散以及增效醛等;在工业上常用作抛光剂。上世纪90年代,世界洋茉莉醛年产量在550吨左右,主要是由中国、日本、西班牙三个国家生产,到2012年,世界洋茉莉醛年产量达到1100吨,世界对洋茉莉醛的需求量在逐年增加。

目前洋茉莉醛的工业生产主要是通过以黄樟油素为原料的半合成法和以邻苯二酚为原料的全合成法,虽然工艺成熟,但环境污染严重,并且耗能较多。随着人们对物质生产过程中的关注及欧洲国家和美国法律对食品添加物质的要求,生物发酵法及酶法生产的的香料物质,被认为是天然的的香料物质,越来越受到人们的青睐。现阶段工业上还没有大规模的生物法生产洋茉莉醛的报道。

本发明在生物技术领域有着广泛的应用前景。

发明人:郑璞 邓志敏 陈鹏程 赵希景 赵明涛 邢晨光

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学校坚持社会主义办学方向,全面贯彻党的教育方针,依照《江南大学章程》,开展自主办学和现代大学制度建设。学校以“笃学尚行,止于至善”为校训,以“彰显轻工特色,服务国计民生;创新培养模式,造就行业中坚”为办学理念,以建设“世界知名、中国一流、江南风格的研究型大学”为战略目标,深入推进教育教学改革,持续提升办学水平,在人才培养、科学研究、社会服务、文化传承创新、国际交流合作等方面取得长足进步,已逐步建成一所规模结构合理、学科协调发展、教学质量优秀、办学效益显著、社会美誉度高,国内有影响力、国际有知名度的特色鲜明的高水平大学。

在本发明的一种实施方式中,将液化沙雷氏菌ZMT-1种子液按体积比5%接种到装液量为20%的发酵培养基中,在温度为30℃,转速为180rpm的条件下,培养24~36h后,加底物,相同温度、转速条件下转化48h。

在本发明的一种实施方式中,转化结束后,向每100mL转化体系中添加湿树脂5~50g,所述树脂为大孔树脂XAD-2或HZ-802,震荡吸附30~60min,将树脂过滤出,用1~2倍于树脂体积的乙酸乙酯洗脱,洗脱液加无水硫酸钠脱水后,滤液30~50℃真空浓缩,于4℃冰箱静置结晶。

本发明从土壤中筛选出一株产洋茉莉醛的菌株Serratia liquefaciens ZMT-1,具有广泛的转化温度22~37℃,并且反应条件温和,可以利用酵母粉等复杂氮源,短时间内可以获得较高的洋茉莉醛产量(160~500mg/L),具有良好的应用前景。

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