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本发明涉及一种重组表达可溶性转录中介体复合物Med23亚基的方法所述方法包括：(1)提供一重组昆虫杆状病毒，所述的杆状病毒的基因组中含有一重组表达盒，所述的重组表达盒含有：Flag蛋白的编码序列，转录中介体蛋白亚基Med23编码序列；(2)将(1)所述的重组昆虫杆状病毒感染昆虫细胞，培养感染后的昆虫细胞，使之表达Flag-转录中介体蛋白亚基Med23；和(3)分离获得可溶性Flag-转录中介体蛋白亚基Med23。本发明第一次表达出了可溶性Med23蛋白，解决了现有技术中难以可溶性表达Med23蛋白的技术难题。

本发明的主要优点在于： (1)首次发现采用昆虫杆状病毒感染昆虫细胞来表达Med23蛋白，并且在Med23编码序列的5’端加上一Flag标签编码序列，可表达获得可溶性的Med23蛋白，其接近于天然的Med23蛋白，保留了良好的生物活性。 (2)对于利用杆状病毒感染昆虫细胞来表达Med23蛋白的工艺及其纯化工艺进行了优化，从而可稳定且大量地获得Med23蛋白。 (3)本发明人的新发现解决了现有技术中难以可溶性表达Med23蛋白的技术难题，第一次重组表达出可溶性Med23蛋白，为研究Med23的生物学功能奠定了基础。

中介体复合物Mediator 是一种进化上保守的,有大约30个蛋自质亚基的复合物,在发育和环境信号的刺激下受到转录因子的招募而参与基因的转录。当受到环境和发育信号的影响时,不同的转录因子就会与 Mediator 的特定亚基相互作用。从而招募RNA 聚合酶工利通用转录因子在基因启动子区形成预起始复合物,进而激活特定靶基因的转录。本论文研究了中介体亚基Med23 在软骨发育中的作用。在间充质干细胞阶段敲掉Med23 , 小鼠出现锁骨短小,骨质减少等异常骨发育表型。且Med23 的敲除还影响了皿h,CoIX 利MMPI3 的表达进而调控了软骨细胞的增殖分化。实验结果表明中介体亚基Med23 在小鼠软骨发育中具有重要的作用。

项目所在单位致力于生命科学前沿基础研究与应用基础研究，依托多学科重点实验室，开展基因调控、RNA与表观遗传学，蛋白质科学，细胞信号转导，细胞与干细胞生物学，癌症和其他重大疾病机理等领域的研究。

皮肤色素合成相关的很多生理和病理过程都与DNA的损伤修复有关,但目前尚不清楚基因转录是如何协调色素生成及DNA损伤修复。转录中介体ME023亚基在黑色素合成及紫外线诱导的DNA损伤修复过程中有极为重要的作用。缺失MED23的黑色素瘤细胞中黑色素显著减少,在斑马鱼中敲低ME023也导致其色素合成下降。鱼的皮肤斑块变淡。同时, MED23缺失导致核苷酸切除修复的相关蛋白高表达并聚集在染色体上,进而保护了紫外线对基因组的破坏。

该项目拟采用作价入股的方式进行转化，后期将根据具体临床条件和医院要求进行落地产业化生产。