成果介绍
本发明公开了一种农杆菌介导的小对叶遗传转化方法。本发明所公开的农杆菌介导的小对叶遗传转化方法,包括如下步骤:以小对叶的叶片为外植体,用处于对数生长期的、OD600值为***-***的目的农杆菌菌液侵染所述外植体5-10分钟;所述目的农杆菌菌液的OD600值优选为***,所述侵染的时间优选为7分钟。用本发明方法对小对叶进行遗传转化,得到的抗性芽率为***%,表明本方法转化效率高。因此,本发明方法为使外源基因在小对叶中稳定表达奠定了基础,对小对叶的遗传改良有十分重要的意义。
成果亮点
1、一种农杆菌介导的小对叶遗传转化方法,包括如下步骤:以小对叶的叶片为外植体,用处于对数生长期的、OD600值为***的目的农杆菌菌液侵染所述外植体5-10分钟;所述目的农杆菌菌液的0D600值优选为***,所述侵染的时间优选为7分钟。
2、根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法中还包括在所述侵染之前,对外植体进行预培养的步骤,所述预培养的时间为1-3天,优选为2天。
3、根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法中还包括在所述侵染之后进行共培养的步骤,所述共培养的时间为4-6天,优选为4天。
4、根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述方法中还包括在所述共培养之后进行脱菌培养的步骤,所述脱菌培养中所用的培养基含有450mg/L的头孢霉素。
5、根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述目的农杆菌含有潮霉素抗性基因。
团队介绍
博士研究生,现任哈尔滨师范大学生命科学与技术学院生物工程与技术系遗传教研室副教授,硕士研究生导师,主要研究领域为植物分子遗传学。发表论文10余篇,其中被SCI、ISTP收录各一篇;获得黑龙江省教育厅奖励3项;参加或主持国家级、省级、厅级课题多项。
成果资料