您所在的位置: 成果库 新序列人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其高效表达

新序列人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其高效表达

发布时间: 2023-11-23

来源: 科技服务团

基本信息

合作方式: 技术转让
成果类型: 实用新型专利
行业领域:
生物与新医药技术
成果介绍
本发明属于基因工程和生物制药领域;在GenBank已收录的A29117的IGF-I基因序列基础上,根据同义突变的原理,利用拼接PCR的方法克隆出大肠杆菌密码子偏爱性的新序列人胰岛素样生长因子-I基因,通过融合表达、亲和层析纯化、酶切获得具有代替牛血清促进CHO细胞生长的活性的人胰岛素样生长因子-I多肽,其优点为新序列的IGF-I在大肠杆菌内的表达量高,可达35-40%,拼接PCR的方法比人工合成全基因的成本明显降低,同时原核表达代替真核表达缩短了培养周期也降低了成本,为人胰岛素样生长因子-I的深入研究及应用打下良好的基础。
成果亮点
1.密码子修改后的新序列的IGF-I在大肠杆菌内的表达量高。对IGF-I进行稀有密码子分析后,利用大肠杆菌密码子使用频率表,以同义突变为原则修改的IGF-I基因在大肠杆菌内的表达量明显升高,可达35-40%。 2.使用拼接PCR的方法明显降低了人工合成基因的成本并且不影响基因序列的准确性。利用生物分析软件***等,合成三段互相有重叠的长的单链DNA分子,价钱与合成引物差不多,在每个碱基***元左右,再利用拼接PCR的方法获得全长的双链DNA,而单纯的双链DNA的全基因合成价钱为每对碱基12元。二者比较,本发明所采用的方法,成本明显降低。
团队介绍
自创立以来,雷锋团队本着为同学服务的宗旨,解决大学生生活问题为核心,为大学生提供广大的创业机会。创立后不久已成为哈尔滨江北十余所大学院校人数最多、最有号召力和影响力的学生团队组织。
成果资料