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本发明公开了一种低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒及制备方法和应用。所述制备方法包括如下步骤：以***(+)为骨架载体，采用NheI和XbaI双酶切处理***(+)，采用同源重组的方式将SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ID ***和SEQ ID ***所示的核苷酸序列顺次插入到载体中，获得第一克隆；将第一克隆转染BHK21细胞，然后感染伪狂犬病毒PRV531，收集细胞培养基上清；纯化后即获得低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒。本发明的低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒在神经环路标记、药物筛选平台的建立、药物抑制病毒作用机制、病毒疫苗和诊断试剂的研发、动物模型的建立、病毒复制和致病机制的分析等方面具有广泛的应用价值。

1.一种低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒的制备方法，包括如下步骤： (1)构建克隆：以***(+)为骨架载体，采用NheI和XbaI双酶切处理***(+)，采用同源重组的方式将SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ID ***、SEQ ***和SEQ ID ***所示的核苷酸序列顺次插入到载体中，获得第一克隆； (2)构建低毒的重组伪狂犬病毒：将步骤(1)所得的第一克隆转染BHK21细胞，然后感染伪狂犬病毒PRV531，收集细胞培养基上清；纯化后即获得低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒。 2.一种低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒，其特征在于，由权利要求1所述的制备方法制备得到。 3.权利要求2所述的低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒在哺乳动物脑神经环路示踪中的应用。 4.权利要求2所述的低毒的逆向神经环路示踪的重组伪狂犬病毒在研究药物抑制伪狂犬病毒作用机制中的应用。

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