科创中国

生物与新医药技术

本发明公开了一种2‑氮己环酮的生物合成代谢通路基因的表达载体和2‑氮己环酮的合成方法。该表达载体包括第一启动子以及在第一启动子下游依次插入的davA‑davB基因或davB‑davA基因、Pb启动子或其突变体、act基因或orf26基因或caiC基因、ChnR基因或其突变体。进一步将表达载体转入高产赖氨酸的谷氨酸棒杆菌中，发酵培养以高效合成2‑氮己环酮。本发明首次在谷氨酸棒状杆菌中合成2‑氮己环酮，首次利用优化的2‑氮己环酮的分子探针系统启动2‑氮己环酮生物合成代谢通路中关键基因的表达，实现2‑氮己环酮的高产。本发明合成方法减少了以赖氨酸为合成原料所需的生产成本，解除了限速步骤，极大地提高了2‑氮己环酮的生物合成产量。

一种2-氮己环酮的生物合成代谢通路基因的表达载体，其特征在于，所述表达载体包括第一启动子以及在第一启动子下游依次插入的davA基因、davB基因、act基因或orf26基因或caiC基因；或， 所述表达载体包括第一启动子以及在第一启动子下游依次插入的davB基因、davA基因、act基因或orf26基因或caiC基因； 优选地，所述表达载体以适用于谷氨酸棒状杆菌表达的载体为骨架； 优选地，所述适用于谷氨酸棒状杆菌表达的载体为p208CES； 优选地，所述适用于谷氨酸棒状杆菌表达的载体为高拷贝质粒p208-HCP。

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