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生物与新医药技术

本发明公开了一种稳定表达外源基因的辛德毕斯病毒载体及其制备方法和应用。利用所述的辛德毕斯病毒载体转染细胞成功制备出携带绿色荧光蛋白基因的SINV感染性病毒颗粒。该感染性病毒颗粒经过体外多轮筛选获得适应性突变，在体外可感染多种细胞，感染后可复制增殖，并能提高外源插入基因的稳定性，在鼠脑神经环路可顺向跨多级突触传播，在脑神经环路标记及示踪、非人灵长类神经细胞的标记、药物筛选平台的建立、药物抑制病毒作用机制、病毒疫苗和诊断试剂的研发、动物模型的建立、病毒复制和致病机制的分析等方面具有广泛的应用价值。

1.一种稳定表达外源基因的辛德毕斯病毒载体，其特征在于，所述辛德毕斯病毒载体以pSINV为骨架载体，在所述骨架载体上连接有荧光蛋白基因EGFP和点突变的NSP1基因； 所述辛德毕斯病毒载体上依次连接有UBC启动子的核苷酸序列、5’UTR、NSP1基因的核苷酸序列、NSP2基因的核苷酸序列、NSP3基因的核苷酸序列、NSP4基因的核苷酸序列、C基因的核苷酸序列、E3基因的核苷酸序列、E2基因的核苷酸序列、6K基因的核苷酸序列、E1基因的核苷酸序列、EGFP基因的核苷酸序列、3’UTR；所述UBC启动子的核苷酸序列如SEQ ***所示；所述5’UTR的核苷酸序列如SEQ ID ***所示；所述NSP1基因的核苷酸序列如SEQID ***所示，所述NSP1基因的第853位核苷酸序列由G突变为A；所述NSP2基因的核苷酸序列如SEQ ID ***所示；所述NSP3基因的核苷酸序列如SEQ ID ***所示；所述NSP4基因的核苷酸序列如SEQ ID ***所示；所述C基因的核苷酸序列如SEQ ID ***所示；

中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。

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