科创中国

生物与新医药技术,医药生物技术

本发明提供一种可用于食用菌菌丝体营养生长阶段RNA提取的方法，可以有效去除培养基质对RNA提取过程的干扰，RNA提取效率高、纯度高、不含PCR酶抑制剂。所述RNA提取的方法，包括前处理阶段和提取阶段，前处理阶段包括下列步骤：1)取一份布满菌丝体的培养基，粗研；2)加入适量的缓冲液I，放置摇床，保持温度35～40℃，摇床转速100～150rpm摇动2～3h；3)取步骤2)的溶液，3000～4000rpm低速离心10～15min；收集上清液；4)步骤3)中剩余的沉淀，加入缓冲液II洗涤2～5次，3000～4000rpm低速离心10～15min，取每次洗涤后的上清液合并；5)将步骤3)和步骤4)离心的上清液集中到一起，在转速10000～12000rpm，4℃离心10～15min，弃上清液，收集沉淀。

1、本发明可以有效去除培养基质对RNA提取过程的干扰，利于菌丝体RNA提取的纯 度。 2、本发明具有RNA提取效率高、纯度高，可以用于进行精密的分子生物学实验。 3、本发明涉及的提取液配方组成，是实验室普遍采用的常规试剂，经济性好。 4、本发明涉及的提取液无毒、无刺激性气味，操作安全。 5、栽培基质和食用菌菌种对提取没有影响，本发明适用于各种栽培基质和食用菌 菌种。

齐鲁工业大学（山东省科学院）坐落于国家历史文化名城——泉城济南，是山东省重点建设的应用研究型大学，山东省最大的综合性自然科学研究机构，山东省属高校高水平大学“冲一流”建设高校。 学校（科学院）坚持以习近平新时代中国特色社会主义思想为指导，立足山东、扎根中国大地办中国特色社会主义大学。学校（科学院）坚定不移地走内涵式发展道路，按照“科教融合、双轮驱动、优化布局、改革创新”的基本思路，围绕立德树人根本任务，坚持“五育并举，全面发展”的育人理念，努力建设国内一流、国际有影响的应用研究型大学。