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一种组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197、工程菌及应用

发布时间: 2023-10-13

来源: 试点城市(园区)

基本信息

合作方式: 技术转让
成果类型: 发明专利,著作权
行业领域:
农、林、牧、渔业
成果介绍
本发明公开了一种组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197、工程菌及应用,属于生物技术领域。组氨醇磷酸氨基转移酶基因来源于藤黄轮丝链霉菌菌株HY61,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述突变体197是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第197位发生单突变获得的,筛选到的突变体酶活较原始提高到***%。本发明构建的组氨醇磷酸氨基转移酶突变体工程菌株,配合充氮保护和稳定剂的使用,有效提高了3‑吲哚丙酮酸的稳定性,且原料廉价易得,生产工艺简单易行、生产成本较低,实现了高产率绿色生产3‑吲哚丙酮酸。
成果亮点
1.一种组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197,其特征在于组氨醇磷酸氨基转移酶基因来源于藤黄轮丝链霉菌菌株HY61,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示;所述突变体197是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第197位丝氨酸突变为组氨酸。 2.一种权利要求1所述组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197的编码基因。 3.含有权利要求2所述编码基因的工程菌。 4.权利要求1所述组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197在催化L-色氨酸合成3-吲哚丙酮酸中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于所述的应用方法为以含组氨醇磷酸氨基转移酶突变体197基因的工程菌经发酵离心收获的菌体细胞作为全细胞催化剂,以L-色氨酸为底物,以L-色氨酸摩尔浓度***倍的丙酮酸为氨基受体,加入25mg/L的辅酶磷酸吡哆醛,1g/L的稳定保护剂的转化体系中,氨水调节pH为***,通氮气驱氧,温度30~40℃的条件下反应生产3-吲哚丙酮酸。 6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于在转化体系中,催化剂的用量以湿菌体重量计为10~40g/L,底物浓度为50~200mM,丙酮酸浓度为60~2
团队介绍
鄄城县左营宏源食品有限公司
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