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生物与新医药技术

本发明公开了一步法生产2‑吡咯烷酮的菌株及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过敲除了前体GABA的代谢途径和一些支路途径，并增强合成途径中一些关键基因的表达，构建了GABA产量提高的谷氨酸棒杆菌工程菌，作为2‑吡咯烷酮合成的底盘细胞；在此基础上表达了Butyricicoccus faecihominis来源的CoA转移酶，使构建的菌株能够以葡萄糖为碳源，在***的环境下发酵2‑吡咯烷酮，发酵96h的产量可达***。

1.一株谷氨酸棒杆菌工程菌，其特征在于，在谷氨酸棒杆菌FF10的基础上，进行了如下改进： (1)敲除丙酮酸脱氢酶，并增加乌头酸水合酶的表达； (2)敲除磷酸乙酰转移酶，并增强6-磷酸果糖激酶的表达； (3)敲除转录调节因子iolR和/或sugR，并过表达谷氨酸脱羧酶； (4)敲除珀酸半醛脱氢酶3，并过表达肌醇转运蛋白； (5)减弱谷氨酸转运蛋白的表达。 2.根据权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌工程菌，其特征在于，所述谷氨酸脱羧酶为谷氨酸脱羧酶GAD MUT128，是具有D38N/I89V/D92N//E93Q/S153T/D202N/P268T/E294R/D301N/F355Y/D432N/H435Q/L451*所示突变的谷氨酸脱羧酶。 3.根据权利要求1或2所述的谷氨酸棒杆菌工程菌，其特征在于，所述谷氨酸棒杆菌工程菌还表达了辅酶A转移酶；所述辅酶A转移酶具有Genbank登录号***所示的氨基酸序列。

中国科学院深圳先进技术研究院提升了粤港地区及我国先进制造业和现代服务业的自主创新能力，推动我国自主知识产权新工业的建立，成为国际一流的工业研究院。 深圳先进院目前已初步构建了以科研为主的集科研、教育、产业、资本为一体的微型协同创新生态系统，由九个研究平台，国科大深圳先进技术学院，多个特色产业育成基地、多支产业发展基金、多个具有独立法人资质的新型专业科研机构等组成。开展先进技术研究，促进科技发展。信息、电子、通讯技术研究新材料、新能源技术研究高性能计算、自动化、精密机械研究生物医学与医疗仪器研究相关学历教育、博士后培养与学术交流。

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