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生物与新医药技术,医药生物技术

本发明涉及一种海洋弧菌及其在制备热稳定特性的ι-卡拉胶酶中的应用，海洋细菌Vibrio ***，菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC No：M2018769，保藏日期2018年11月27日，保藏地址中国武汉市武汉大学。本发明所述的ι-卡拉胶酶为重组表达工程菌株纯化所得，具有热稳定特性，在40℃的活性半衰期长达***，30℃的活性半衰期长达42h，具备工业化应用潜质。

本发明的目的是提供一种海洋弧菌，海洋细菌Vibrio ***，菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC No：M2018769，保藏日期2018年11月27日，保藏地址中国武汉市武汉大学。 本发明的目的之二是提供上述海洋细菌Vibrio ***在制备具有热恢复特性的ι-卡拉胶酶CgiV中的应用。 优选的：上述海洋细菌Vibrio ***的基因序列在制备具有热恢复特性的ι-卡拉胶酶CgiV中的应用。 双酶切处理的PCR产物和pET-22b(+)质粒载体参照DNA连接酶说明书进行连接反应；连接产物转化至大肠杆菌DH5α菌株，涂布在Luria-Bertani(LB)培养基固体平板上，含有50μg/mL氨苄青霉素的，37℃温箱中培养12-16小时后，挑取单克隆；将单克隆转接至LB液体培养基中，含有50μg/mL氨苄青霉素，转速为180rpm的37℃摇床中培养过夜，将单克隆进行序列测定，选择阳性克隆，并将其命名为pET22b-CgiV，重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)，将重组大肠菌株命名为BL21(DE3)/pET22b-C

此技术是青岛大学李尚勇研发，青岛大学，位于山东省青岛市。培养高等学历人才，促进科技文化发展。

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