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建立一种检测引起婴幼儿急性腹泻常见病毒的多重PCR方法,探讨影响多重PCR扩增的因素. 将建立的多重检测方法应用于临床婴幼儿腹泻标本,对多重检测方法进行评价,使多重方法能够直接检测并鉴别临床标本中相应的腹泻病毒. 初步了解引起临床婴幼儿急性腹泻的常见病毒的病原分布情况,为临床防治提供依据. 对引起临床婴幼儿急性腹泻的主要病原-A组轮状病毒进行常见G,P分型分析,为轮状病毒疫苗的研究和开发提供基础资料.分析病毒基因组保守区,根据保守区基因序列,使用Primer5.0和Oligo6.0软件设计,评价PCR扩增引物. 3多重PCR方法检测婴幼儿急性腹泻常见病毒 优化反应体系,建立RNA腹泻病毒多重PCR筛查体系.阳性产物用测序引物二次扩增,经测序予以确证. 4单重PCR法筛查临床腹泻标本EAdV,阳性产物经纯化测序确证.小儿感染性腹泻病病原主要为病毒，其次为细菌，真菌等引起的腹泻相对较少见，对于小儿感染性腹泻，常用的病原学检测方法包括电镜法、培养法、免疫学方法及分子生物学方法等。病原学证据是临床诊断的重要依据。随着检测方法的不断创新，病原学的诊断能力也逐渐提高。通过不同检测技术，进行病原分析，可为临床合理治疗提供重要依据。 咨询专家签字： 年 月 日