本发明公开了一种马流产沙门氏菌C-ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由保藏编号为CGMCC No. 21990的杂交瘤细胞株分泌产生的抗马流产沙门氏菌FljB蛋白的单克隆抗体。本发明建立的马流产沙门氏菌C-ELISA抗体检测方法其敏感性比现行凝集试验TAT高32倍。C-ELISA方法的特异性更好:与常见的马传贫、马流感、马鼻肺炎、马动脉炎等病毒病以及马腺疫、鼠伤寒沙门氏菌感染、都柏林沙门氏菌感染等细菌病的血清抗体均不反应,仅与马流产沙门氏菌特异性抗体反应。 本发明为马流产沙门氏菌抗体的检测提供了一种新的技术手段,适合实验室对马流产沙门氏菌抗体的快速高通量检测,可用于疾病诊断、动物免疫状态评估和监测。
本发明是国际首个马流产沙门氏菌抗体C-ELISA试剂盒,主要具有以下特点和优势: ① 特异性强:该试剂盒仅可以检测出马流产沙门氏菌特异性阳性血清,对于其他沙门氏菌和常见马传染病阳性血清检测无交叉反应。 ② 敏感性高:高于试管凝集试验的检测敏感性。 ③ 重复性:该试剂盒不同批次的组内、组间试验重复非常好。 ④ 高通量:相对于试管凝集试验,可以实现样品的高通量检测。 ⑤ 快速:整个实验仅需要30分钟。在反应时间上比传统方法缩短40倍以上,使检测效率大大提高 ⑥ 样品操作简便:无需稀释,大量样品检测效率更高。 ⑦ 不受血清种属来源的限制,驴血清和马血清均可以检测。
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(简称“哈兽研”)马传染病和慢病毒病研究创新团队(简称“马病团队”)是我国唯一的一支国家级马病研究团队,70年来专注马传染病的研究,是国家认定的国家马传染性贫血参考实验室、国家马鼻疽参考实验室,世界动物卫生组织 OIE认定的马传染性贫血参考实验室。在历史上,团队早期领导人兽医免疫学家中国工程院沈荣显院士研制成功了马传染性贫血病毒弱毒疫苗,成功控制了该病在国内的流行,并获得国家技术发明一等奖。目前团队由王晓钧研究员带领,有高级职称固定研究人员10人,博士后、博士、硕士生20余人。在马传贫、马流感等研究领域处于国际先进水平,研发了马流感等5种马(驴)用疫苗、20多种常见重要马传染病诊断试剂盒。长期开展马病流行病学监测、病原学、免疫学和防控技术研究。
评价单位:“科创中国”现代高效畜牧产业科技服务团 (中国畜牧兽医学会)
评价时间:2023-12-05
综合评价
沙门氏菌病是一种重要的细菌性疾病,给养猪业、禽业、鸽业、马、驴等产业带来巨大的经济损失。马流产沙门氏菌病(Equine abortus salmonellosis),又称为马副伤寒(Equi parathphoid),是由马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi S .abortusequi)、鼠伤寒沙门氏菌(S .typhimurium S .typhi)、都柏林沙门氏菌 (S .dublin)、肠炎沙门氏菌(S .enteritidis)等引起的以马属动物流产为特征的传染病。其中马流产沙门氏菌的最主要病原,先前也有报道鼠伤寒沙门氏菌单独或与马流产沙门氏菌混合感染导致驴流产及驴驹腹泻(崔思列 ,李春盛 .驴驹鼠伤寒沙门氏菌病调查研究报告 .兽医科技杂志 ,1983 ,(02):10‑16),而都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌引起的马驴流产并不多见,鲜有报道。目前没有关于马流产沙门氏菌病通用型的ELISA血清学诊断方法,传 统的试管凝集试验敏感性低,微量凝集试验虽然敏感性得到了提升,但是由于肉 眼观察凝集现
象本身也限制了敏感性的进一步提高,所以,急需建立一种敏感性 高、特异性好的且可同时检测马流产沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏 菌、肠炎沙门氏菌抗体的通用型ELISA方法。
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