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马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA检测试剂盒的制备方法和应用

发布时间: 2023-07-14

来源: 科技服务团

基本信息

合作方式: 技术许可
成果类型: 发明专利
行业领域:
生物与新医药技术,农、林、牧、渔业,畜牧业,农、林、牧、渔专业及辅助性活动
成果介绍
本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒及其制备方法和应用。所述的试剂盒中包含马流产沙门氏菌FljB蛋白包被的酶标板,其中,所述的马流产沙门氏菌FljB蛋白由SEQ ID NO .2所示的序列编码。本发明通过序列分析后,以P3/P4扩增马流产沙门氏菌特异性序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a,构建重组表达质粒pET28a-FljB,转化入Rosetta( DE3 ),用IPTG进行诱导表达,以纯化后的FljB蛋白作为包被抗原,建立马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA方法,结果显示,以该蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法,具有良好的特异性、敏感性、重复性,可以用于临床马流产沙门氏菌抗体的检测。
成果亮点
本发明是国际首个马流产沙门氏菌特异性ELISA试剂盒,主要具有以下特点和优势:①特异性强:该试剂盒仅可以检测出马流产沙门氏菌特异性阳性血清,对于其他沙门氏菌和马传染性疾病血清检测均为阴性。②敏感性高:高于试管凝集试验的检测敏感性。③重复性:该试剂盒不同批次的组内、组间试验重复性非常好。④高通量:相对于试管凝集法,可以实现样品的高通量检测,效率更高。
团队介绍
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(简称“哈兽研”)马传染病和慢病毒病研究创新团队(简称“马病团队”)是我国唯一的一支国家级马病研究团队,70年来专注马传染病的研究,是国家认定的国家马传染性贫血参考实验室、国家马鼻疽参考实验室,世界动物卫生组织 WOAH认定的马传染性贫血参考实验室。在历史上,团队早期领导人兽医免疫学家中国工程院沈荣显院士研制成功了马传染性贫血病毒弱毒疫苗,成功控制了该病在国内的流行,并获得国家技术发明一等奖。目前团队由王晓钧研究员带领,有高级职称固定研究人员10人,博士后、博士、硕士生20余人。在马传贫、马流感等研究领域处于国际先进水平,研发了马流感等5种马(驴)用疫苗、20多种常见重要马传染病诊断试剂盒。长期开展马病流行病学监测、病原学、免疫学和防控技术研究。
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