本发明公开了一种细胞荧光标记方法,将点击化学与荧光量子点技术相结合,通过点击化学修饰连接剂,使用纳米量子点对细胞进行荧光标记。该方法由于使用点击化学,使量子点与生物体共价连接,快速简便,且标记产物稳定,特异性好。基于活体细胞的荧光标记,或活体荧光成像技术不需要杀死动物,可以对同一个 动物进行长时间反复跟踪成像,既可以提高数据的可比性,避免个体差异对试验结果的影 响。更重要的是,该技术可以得到直观的成像图片,了解标记物在动物体内的分布和代谢情 况,避免了传统的体外实验方法的诸多缺点,特别是在在癌症细胞转移及干细胞相关研究、 药物制剂学、药物临床前研究中有不可估量的应用前景。
一种细胞荧光标记方法,包括以下步骤: A. 使细胞与点击化学修饰连接剂结合:在含有A549肺癌细胞或RAMOS淋巴瘤细胞的 DMEM培养液中,添加带有环炔基的点击化学修饰连接剂,室温反应30分钟,得到细胞-点击 化学修饰连接剂复合培养液,用pH为7. 2-7. 6的缓冲液洗涤,以去除多余的点击化学修饰 连接剂,并离心收集细胞,其中点击化学修饰连接剂的量为细胞摩尔量的10-100倍; B. 使用叠氮-荧光量子点复合物对细胞进行荧光标记:将叠氮-荧光量子点复合物加 入步骤A得到的培养液中,室温孵育30分钟,得到荧光量子点标记的生物体培养液,用pH 为7. 2-7. 6的缓冲液洗涤,以去除多余的叠氮-荧光量子点复合物,并离心收集荧光量子点 标记的细胞,其中叠氮-突光量子点复合物的量为细胞摩尔量的10-100倍
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评价单位:“科创中国”天津中科院先进科技成果技术转移转化专业科技服务团 (天津中科先进技术产业有限公司)
评价时间:2023-11-21
综合评价
该发明有效的避免了传统的体外实验方法的诸多缺点,特别是在在癌症细胞转移及干细胞相关研究、 药物制剂学、药物临床前研究中有不可估量的应用前景,值得推广。
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