本发明涉及一种防治禽流感H5N1的重组杆状病毒疫苗的制备方法,具体涉及一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株及其制备方法,具体包含以下步骤:1)pS?ITRs?HA质粒的构建,2)pS?ITRs?HA质粒转化*** DH10 Bac,3)重组杆状病毒穿梭载体转染Sf9昆虫细胞,4)重组杆状病毒的扩增。制备获得的重组H5N1病毒疫苗株对免疫鸡的血清进行免疫检测,免疫鸡血清中IgG抗体的水平最高可达***,IL?2、IL?4和IFN?γ的浓度最高可分别达到***、***和***,以上结果表明重组杆状病毒疫苗可有效的刺激鸡体同时产生体液免疫和细胞免疫,为鸡群提供了双重免疫保护作用,本发明为基于杆状病毒的禽流感疫苗的研发奠定理论基础。
本发明的另一方面提供了一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株,其中在病毒基因中插入包含禽流感病毒血凝素HA基因的基因片段,所述HA基因片段的核苷酸序列为SEQIDNO:1;优选还包含启动子CMV的核苷酸序列为SEQIDNO:2、调控元件VSV-GED的核苷酸序列为SEQIDNO:3、调控元件WPRE的核苷酸序列为SEQIDNO:4和/或调控元件ITRs的核苷酸序列为SEQIDNO:5。
本发明再一方面还提供了一种重组H5N1病毒疫苗,其中包含根据权利要求1或2所述的表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株作为活性成分。
黑龙江大学(Heilongjiang University),位于黑龙江省哈尔滨市,是黑龙江省人民政府和中华人民共和国教育部、国家国防科技工业局共建的省属综合性大学,黑龙江省“双一流”建设国内一流大学A类高校,入选国家卓越法律人才教育培养计划、中西部高校基础能力建设工程、特色重点学科项目、国家建设高水平大学公派研究生项目、中国政府奖学金来华留学生接收院校、全国深化创新创业教育改革示范高校、教育部来华留学示范基地,是世界翻译教育联盟、中俄新闻教育高校联盟、中俄综合性大学联盟、上海合作组织大学、“一带一路”智库合作联盟成员单位。
评价单位:“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会)
评价时间:2023-11-07
综合评价
技术前景广阔,具备技术成果转移转化要求。
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