科创中国
紫花苜蓿的MsbHLH115基因的应用和含有MsbHLH115基因的重组载体
发布时间: 2022-12-09
来源: 科技服务团
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物与新医药技术
成果介绍
本发明公开了紫花苜蓿的MsbHLH115基因的应用和含有MsbHLH115基因的重组载体，属于基因工程技术领域，本发明为了解决如何促进植物提前开花的问题，本发明提供了一种促进植物花期提前的方法，通过构建重组载体pBI121‑MsbHLH115，将重组载体转入到农杆菌中制备携带MsbHLH115基因的农杆菌，然后利用农杆菌介导的叶盘法得到携带MsbHLH115基因的转基因植物，通过培养携带MsbHLH115基因的转基因植物，发现此植物会提前开花，本发明的方法具有方便、快捷和耗时短的优点，利用该方法得到的植物的开花时间比野生型显著提前。
成果亮点
1)将携带重组载体pBI121-MsbHLH11的农杆菌涂布于含有卡那霉素、链霉素和利福平的YEB固体培养基上，在28℃条件下，培养48h；
2)利用1/2MS液体培养基重悬步骤1)得到的农杆菌的菌落，得到农杆菌的菌液，再用1/2MS将菌液稀释至OD600值为***；
3)取植物叶片，在步骤2)得到的农杆菌的菌液中侵染5min-7min，将植物叶片取出放置于无菌滤纸上，吸去附着的菌液，放置于MS1培养基上，在黑暗条件下培养2天。
进一步地限定，步骤(3)中预培养处理是将植物叶片切成1cm×1cm的方形，预培养48h。
有益效果：本发明使用的农杆菌介导的叶盘法利用1/2MS液体重悬菌落获得菌液，测定菌液浓度方便且耗时较短，并且本发明得到的携带MsbHLH115的植物的开花率高于野生型的植物，颜色鲜绿的烟草植株作为外植体时诱导愈伤组织的效率会显著高于幼嫩、黄化的烟草植株。
团队介绍
雷锋团队是由哈尔滨师范大学14级政治与行政学院的关明贺同学于2015年9月1日建立的学生自主创立的创业团队。在黑龙江福成科技有限公司的赞助下，旨在为江北的大学生服务，让大学生过上更好的大学生活。自创立以来，雷锋团队本着为同学服务的宗旨，解决大学生生活问题为核心，为大学生提供广大的创业机会。创立后不久已成为哈尔滨江北十余所大学院校人数最多、最有号召力和影响力的学生团队组织。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2023-11-11
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2023-01-06
黄剑华
哈尔滨工业大学
教授
综合评价
(1)构建上述的重组载体pBI121-MsbHLH115；
(2)制备携带MsbHLH115基因的农杆菌：将步骤(1)得到的重组载体pBI121-MsbHLH115转入到农杆菌感受态中培养，得到携带MsbHLH115基因的农杆菌；
(3)制备携带MsbHLH115基因的植物：培养植物的种子达到苗期，然后对植物进行预培养处理，然后将步骤(2)中得到的农杆菌侵染预培养处理后的植物，然后经过芽诱导、生根诱导和移栽驯化，得到携带MsbHLH115基因的植物；
(4)培养携带MsbHLH115基因的植物：
进一步地限定，步骤(1)所述重组载体的构建方法为利用限制性内切酶分别酶切载体pMD18T-MsbHLH115和pBI121质粒，得到MsbHLH115基因的序列片段与pBI121质粒的酶切产物，然后将MsbHLH115基因的序列片段与pBI121质粒的酶切产物进行连接反应，连接反应的体系是：5μL的pBI121质粒酶切产物、3μL的MsbHLH115基因的序列片段、1μL的10×T4DNA连接缓冲液和1μL的T4 DNA连接酶，反应温度为16℃，反应时间为12h，获得重组载体pBI121-MsbHLH115。
查看更多>
微信公众号
下载app
Copyright © 2022 中国科学技术协会 版权所有 | 京ICP备16016202号-20
京公网安备 11010202008974号