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生物与新医药技术

一种响应缺铁胁迫的诱导型启动子GmbHLH47启动子及其应用，属于基因工程技术领域。为了提高植物的抗铁胁迫能力，本发明提供了一种响应缺铁胁迫的诱导型启动子GmbHLH47启动子，该启动子从大豆GmbHLH47基因启动子区域克隆得到，核苷酸序列如SEQ ID ***所示。通过对该启动子区的分析发现其中含有多种可能参与多重逆境胁迫的顺式作用元件。当用缺铁培养基对转基因植株进行处理后，发现GmbHLH47启动子可以增加外源基因GUS的表达，致使转基因植株的染色加深，证明GmbHLH47启动子受缺铁胁迫诱导。作为一个受缺铁胁迫诱导的启动子，其启动子区域和上游调控序列在基因工程和提高植物抵抗缺铁方面起着重要作用。

(1)构建含有GmbHLH47启动子的重组载体，所述GmbHLH47启动子的核苷酸序列如SEQ ID ***所示； (2)制备携带GmbHLH47启动子的农杆菌：将步骤(1)得到的重组载体转入到农杆菌感受态中培养，得到携带GmbHLH47启动子的农杆菌； (3)制备携带GmbHLH47启动子的转基因植物：利用将步骤(2)得到的农杆菌侵染植物，得到携带GmbHLH47启动子的植物。 进一步地限定，步骤(1)所述重组载体的构建方法具体如下：利用限制性内切酶分别酶切载体pMD18T-GmbHLH47启动子和pBI121-GUS质粒，得到GmbHLH47启动子的序列片段与pBI121-GUS质粒的酶切产物，然后将GmbHLH47启动子的序列片段与pBI121-GUS质粒的酶切产物进行连接，获得pBI121-GmbHLH47pro::GUS。 进一步地限定，上述连接反应的体系是：5μL的pBI121-GUS质粒酶切产物、3μL的GmbHLH47启动子的序列片段、1μL的10×T4 DNA连接缓冲液和1μL的T4 DNA连接酶，反应温度为16℃，反应时间为12h。

雷锋团队是由哈尔滨师范大学14级政治与行政学院的关明贺同学于2015年9月1日建立的学生自主创立的创业团队。在黑龙江福成科技有限公司的赞助下，旨在为江北的大学生服务，让大学生过上更好的大学生活。自创立以来，雷锋团队本着为同学服务的宗旨，解决大学生生活问题为核心，为大学生提供广大的创业机会。创立后不久已成为哈尔滨江北十余所大学院校人数最多、最有号召力和影响力的学生团队组织。

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