科创中国
一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法
发布时间: 2022-12-05
来源: 科技服务团
基本信息
合作方式：
技术服务
成果类型：
发明专利
行业领域：
生物产业,其他生物业
成果介绍
本发明涉及一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法，属于兽用生物制品技术领域，解决了目前鲤浮肿病毒不能体外培养的问题。本发明采用未感染任何病原体的健康松浦镜鲤幼鱼的头肾组织进行酶解处理，对其进行原代细胞培养，将过滤除菌的鲤浮肿病毒阳性的鳃组织匀浆液接种于鲤头肾原代细胞上，对培养后的病毒进行PCR鉴定；测序结果比对，与已公布的鲤浮肿病毒核苷酸序列同源性均为98%以上，说明鲤浮肿病毒能够在鲤头肾原代细胞上分离培养并稳定增殖。本发明的方法实现了鲤浮肿病毒体外细胞传代培养，对该病毒的基础生物学特性研究及疫苗的研发奠定了基础，本发明的方法的实验材料获取广泛，易于实验室操作，能够适用于鲤浮肿病毒体外培养及增殖。
成果亮点
采用2×MasterMix25 µL，10pmol/µL上游和下游引物各2 µL，模板5 µL，DEPC水补至50µL的反应体系进行两轮PCR扩增，如表1-2所示。反应条件为95℃预变性4 min，95℃变性1 min，45℃退火1 min，72 ℃延伸1 min，35个循环后72℃延伸10 min，4℃保存，如表3所示。PCR扩增产物采用***%琼脂糖电泳，核酸染色剂染色。电压150 V，电泳30 min，标准分子量作对照，结果用凝胶成像系统处理。将PCR阳性产物进行测序，测序结果在NCBI上进行blast对比。
团队介绍
农学院是东北农业大学长子学院，由1948年东北农学院建院时成立的三系之一农艺系发展而来，王金陵教授任首任系主任。1996年，由农学系、园艺系、植保系三系合并组建农学院。2000年，园艺系调整出去成立园艺学院，土壤农化、环境保护、微生物及农业生态等4个专业和方向调整出去组建资源与环境学院，农学实验站调整出去成为学校的植物类实验实习基地，农学系余下专业和植保系组成新的农学院。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2023-11-11
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2022-12-07
宋奇慧
千慧科技咨询服务有限公司
总经理
综合评价
本发明的优点及有益效果：本发明的方法实现了鲤浮肿病毒体外细胞传代培养，解决了目前鲤浮肿病毒不能体外培养的问题，对该病毒的基础生物学特性研究及疫苗的研发奠定了基础，本发明的方法的实验材料获取广泛，易于实验室操作，能够适用于鲤浮肿病毒体外培养及增殖，为鲤浮肿病毒易感细胞系的建立提供了新的依据。
查看更多>
微信公众号
下载app
Copyright © 2022 中国科学技术协会 版权所有 | 京ICP备16016202号-20
京公网安备 11010202008974号