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项目采用 MLVA-16 分型法、原核真核表达、CCK8试验、MTS试验、流式细胞式试验及实验小鼠抗体检测，我省目前流行的布鲁菌存在丰富的基因多态性；布鲁氏菌的外膜蛋白Omp10，Omp15，Omp19，Omp22，Omp25，Omp31在DE3表达菌的包涵体中表达，纯化蛋白后，Omp25表达量最高，达*** mg/mL。转染293T细胞，上述Omps蛋白在真核细胞的细胞浆内和细胞膜上都发现了明显的荧光信号。小鼠脾淋巴细胞增殖能力显著增强，具有增强细胞免疫功能的作用；MTS试验发现Omp10、Omp22、Omp25、Omp31对淋巴细胞活力的影响更明显，可很好刺激淋巴细胞增殖，刺激小鼠产生细胞免疫应答。流式细胞仪进行检测，在小鼠脾脏中CD3+ 、CD4+和CD8+都有一定的比例产生，而且实验组 CD4+/ CD8+比值要小于 PBS 组，认为CD8+介导的免疫占据了主要作用，促进 CD8+T 淋巴细胞的增殖分化，表明激发了显著的 CTL效应。

1、对布鲁氏菌基因型分析，认为在青海省以羊种布鲁氏菌为主，存在丰富的基因多态性。 2、构建了Omps-PET8a原核表达载体、***等真核表达载体。通过CCK8、MTS、流式细胞术等试验对布鲁氏菌Omp10，Omp15，Omp19，Omp22，Omp25，Omp31蛋白的抗原性、反应性进行了研究。结果表明，Omp31蛋白的体液免疫应答和细胞免疫应答效果最佳。 3、申请国家发明专利1件。发表论文1篇，投稿论文2篇，其中SCI论文1篇。培养研究生2名（其中1名在读），本科生5名。

青海大学组建，完成人： 李英、李增魁、高小龙、王建玲、王维忠、赵文信、陈长江、党媛、徐生瑞、汪生花、马金秀、宋永青、耿鹏程、尕么江永、张连兄