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一种基于全基因组结合生物信息学特异性筛选华根霉脂肪酶基因的方法

发布时间: 2022-10-19

来源: 试点城市（园区）

基本信息

合作方式： 技术转让
成果类型： 发明专利,新品种,新技术
行业领域：
生物与新医药技术,化学药
成果介绍
本发明公开了一种基于全基因组结合生物信息学特异性筛选华根霉脂肪酶基因的方法,属于基因工程领域。本发明针对具有特定催化性能和用途的目标脂肪酶,通过全基因组脂肪酶基因挖掘,分类、催化特性预测得到候选基因;将候选基因分别在大肠杆菌中表达,通过分别检测可溶蛋白和包涵体活性进行筛选,获得具有特定催化性能的华根霉脂肪酶基因,并在重组大肠杆菌中进行活性表达制备。最终获得了编码仅在包涵体状态下表现酯合成活性和甲醇解活性的脂肪酶的基因。
成果亮点
可溶性蛋白的获得方法优选将带有目的基因的pET-22b转化*** BL21(DE3)，将阳性转化子单菌落接入含Amp抗性的5ml LB液体培养基的试管中，于37℃200rpm培养3-4个小时作为种子液，1L LB液体培养基中加入3试管种子液，30℃200rpm培养1小时，加入IPTG至终浓度***进行诱导，16℃180rpm诱导2小时，离心收集菌体，在适当的缓冲液中超声破碎，离心后得到的上清液即为脂肪酶溶液。
团队介绍
发明人：王栋 徐岩 喻晓蔚 江南大学是教育部直属、国家“211工程”重点建设高校和“双一流”建设高校。学校具有悠久的办学历史、厚重的文化积淀，源起1902年创建的三江师范学堂，历经国立中央大学、南京大学等发展时期；1958年南京工学院食品工业系整建制东迁无锡独立建校，成立无锡轻工业学院；1962年无锡纺织工学院并入无锡轻工业学院；1995年更名为无锡轻工大学；2001年无锡轻工大学、江南学院、无锡教育学院合并组建江南大学；2003年东华大学无锡校区并入江南大学。
成果资料
产业化落地方案
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