科创中国

生物与新医药技术

本技术形成了罗汉果的细胞系优化条件和诱导子的最佳工艺，并在15L生物反应器上进行小试试验。（1）对新生罗汉果细胞系进行培养条件的优化，罗汉果细胞干重达*** g/L，比原培养基提升***%。新生愈伤组织悬浮培养周期为15天，细胞干重达*** g/L，甜苷Ⅴ产量达*** mg/L，比COS细胞的生长量提高***倍，罗汉果甜苷Ⅴ的产量提高98%。 （2）本技术对 Phe、MJA、SA、Betaine等诱导子进行种类及其浓度的筛选，诱导子添加可以显著促进罗汉果新生愈伤组织的甜苷Ⅴ的合成，添加150 μmol/L茉莉酮酸甲酯时，甜苷Ⅴ产量达到最高（*** mg/g DCW）。在15L机械搅拌式反应器中最适合罗汉果细胞悬浮培养，细胞干重达到最大*** g/L。

本技术对不同类型的愈伤组织悬浮培养的特性进行考察，胆碱和Vc诱导培养出一种适合悬浮培养的高产罗汉果悬浮细胞系；并对其进行培养基、培养温度、培养光照等培养条件优化；筛选了新生愈伤组织的诱导子种类及其最适添加浓度，并应用于15L机械搅拌式反应器放大培养，实现了小试规模的体外培养，为工业化生产提供了很好的技术基础。

本团队是华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的研究团队，在植物细胞悬浮培养、胚性愈伤组织制备和工艺放大等方面具有丰富的经验，已对10种珍稀植物进行了悬浮培养技术进行开发，有些产品已登记为新资源食品和化妆品新原料。

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