科创中国
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒
发布时间: 2022-08-01
来源: 科技服务团
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
新技术
行业领域：
生物产业
成果介绍
非洲猪瘟是一种烈性传染病，死亡率高达100%，被世界动物卫生组织（OIE）列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病，是我国重点防范的外来动物疫病之一。我们采用TaqMan MGB探针设计，与传统探针比较，该探针长度缩短，提高了探针Tm值，使探针和模板杂交的稳定性大大提高；由于探针3端标记非荧光淬灭基团，其本身不产生荧光，与其它non-MGB NFQ相比，本底信号大大降低，提高了敏感性，使实验结果更加精确。我们基于非洲猪瘟病毒p72基因的保守区设计多组引物和MGB探针，筛选出敏感性和特异性最优的引物和探针组合，同时对反应的参数进行了优化，研制出非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒。该检测试剂盒可检测目前的流行毒株，具有通用性。
成果亮点
该产品特点如下：
1.试剂盒敏感性：对质粒标准品的最低检测限为5拷贝/μl。
2.试剂盒特异性：检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病病毒，结果均为阴性。
3.重复性：试剂盒重复检测强阳性、阳性、弱阳性和阴性样品，批间和批内的变异系数均小于10%。
4.保存期：-20℃保存，有效期为12个月。
5.同种方法或同类产品比对：与OIE推荐的荧光PCR方法总符合率为100%；与市售同类制品总符合率均为***%。
6.应用范围：用于猪脾脏、淋巴结、肉品、血液及血液制品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。
7.操作特点：操作简便，时间短，效率高，可在20min内出结果。
团队介绍
哈尔滨国生生物科技股份有限公司（动物用生物制品国家工程研究中心，以下简称“国生生物”）是一家以检测产品孵化、生产销售和服务为主业的研发型企业。2010 年，在国家发改委批准下，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国兽医药品监察所、哈尔滨维科生物技术有限公司、北京中海生物科技有限公司和哈药集团有限公司共同组建成立哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司，2013 年正式进驻运营，2016 年变更为股份有限公司。
国生生物拥有 6 大研发技术平台，包括：新型疫苗研发平台、疫苗生产工艺平台、诊断试剂平台、检测检验技术平台（疫苗质量检验）、治疗性抗体平台、实验动物平台。平台优势结合更灵活的企业化运作形式，国生生物得以将科研院所一线成果迅速落地产业化、商品化。
成果资料
产业化落地方案
成果综合评价报告
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2023-11-14
评价单位：“科创中国”黑龙江科技服务团 (黑龙江省科学技术协会) 评价时间：2022-11-28
宋要武
东北石油大学
大学教授
综合评价
、省时便捷
操作人员无需特殊培训，完成样品检测仅需30分钟左右。
2、敏感性高
采用Taqman MGB探针设计，最低检出量为5copies/μl，灵敏度显著高于OIE便准。
3、特异防污
含有UDG酶防污染系统，保证扩增结果的特异性，有效避免假阳性的检出。
4、样品均适
适用于动物血液（全血、血清、血浆）及血液制品、各种组织、肉骨粉、血粉、拭子类、环境取样等样品中的ASFV核酸的检测。
5、误差修正
试剂组份预混ROX Reference Dye，修正加样误差和孔间物理误差，提高样品间的可重复性。
6、配合仪器
配合techne Pro 48荧光定量PCR，使用10μl扩增体系，节省试剂和检测时间。
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