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本发明公开了一种基于靶向测序的病原微生物检测引物组，属于微生物检测技术领域。所述病原微生物检测引物组包括第1引物对至第56引物对，其中，第n引物对由SEQIDNo.(2n‑1)所示的第n正向扩增引物和***所示的第n反向扩增引物组成，n＝1～56。本发明还公开了包含所述引物组的病原微生物检测试剂盒，以及利用引物组或试剂盒对病原微生物检测的多重PCR扩增方法。利用本发明检测病原微生物，具有病原覆盖全面、灵敏度高、检测通量高、成本低等优势，能够辅助临床精准识别常见病原体，涵盖细菌、真菌、DNA病毒、RNA病毒、寄生虫、支原体衣原体等，具有重要的临床应用价值。 本发明公开了一种基于靶向测序的病原微生物检测引物组，属于微生物检测技术领域。所述病原微生物检测引物组包括第1引物对至第56引物对，其中，第n引物对由SEQIDNo.(2n‑1)所示的第n正向扩增引物和***所示的第n反向扩增引物组成，n＝1～56。本发明还公开了包含所述引物组的病原微生物检测试剂盒，以及利用引物组或试剂盒对病原微生物检测的多重PCR扩增方法。利用本发明检测病原微生物，具有病原覆盖全面、灵敏度高、检测通量高、成本低等优势，能够辅助临床精准识别常见病原体，涵盖细菌、真菌、DNA病毒、RNA病毒、寄生虫、支原体衣原体等，具有重要的临床应用价值。