科创中国

本发明属于生物化工酶催化技术领域，具体涉及一种在有机介质体系中化学酶法制备内吗啡肽-1的生产方法。本发明采用耐有机溶剂蛋白酶WQ9-2在50%DMSO反应体系中由Boc-Trp和Phe-NH2合成二肽Boc-Trp-Phe-NH2，产物析出，然后酸解除去Boc保护基团生成Trp-Phe-NH2；采用耐有机溶剂蛋白酶PT121在水-有机溶剂双相反应体系中催化Boc-Tyr-Pro-OH和Trp-Phe-NH2反应生成Boc-Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2，产物被萃取到上相有机层，取有机层水洗，除去溶剂得Boc-Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2，然后酸解生成内吗啡肽-1(Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2)。本发明采用粗酶液高效催化，产率高，相对商品酶成本低。反应过程中采用的有机溶剂体系实现了底物与产物的反应分离耦合，大大提高了收率，简化了产物的分离纯化步骤。