一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒及使用方法,属于生物医学领域。一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒,包括:用于检测泛素结合酶抗体的溶液;所述溶液包含用于标记泛素结合酶抗体的活性酯和非放射性溶液。所述活性酯包括硫代钌衍生物活性酯和生物素聚乙二醇活性酯。所述试剂盒还包括96孔平板、链霉亲和素石墨烯平板、***的PBS溶液、5%的BSA溶液和PBST溶液。所述链霉亲和素石墨烯平板为链霉素标记的MSD96孔板。与现有技术相比,本申请的试剂盒具有较高的灵敏度和特异性,无放射物质使用,操作简便,能检测微量血清中的抗体量,具有很好的临床应用价值。