本发明涉及一种赖氨酸脱羧酶、制备方法及其应用。本发明采用易错PCR和DNA改组这两种技术相结合的定向进化策略,对本实验室构建的一株含编码赖氨酸脱羧酶基因ldc的菌株进行了改造,获得一株比酶活提高了***倍的突变菌株,突变使得产物1,5-戊二胺的发酵生产时间缩短了25%。本发明还提出了一种筛选赖氨酸脱羧酶的快速平板筛选方法,把每一轮的筛选过程缩短了1-2天。在突变体的氨基酸中,涉及到的氨基酸突变为Val147Phe/Glu583Gly。本发明也公开了编码赖氨酸脱羧酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。本发明具有高效性和简便的可操作性。