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活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修饰水平的方法

发布时间: 2022-05-19

来源: 试点城市（园区）

基本信息

合作方式： 技术转让
成果类型： 发明专利,新技术
行业领域：
生物产业,制造业
成果介绍

活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修饰水平的方法。所述的方法包括以下步骤：(1)构建目的基因野生型启动子荧光素酶载体；(2)构建带有特定限制性内切酶位点的目的基因突变型启动子荧光素酶载体；(3)获得目的基因启动子区仅特定顺式作用元件高甲基化(>90%)的环形pGL3质粒。将所得环形质粒直接转染U251细胞，利用荧光素酶报告系统分析各顺式作用元件甲基化修饰改变对基因启动子活性的影响。通过特定序列甲基化再环形质粒法，实现了活细胞内目的基因启动子上特定顺式作用元件甲基化修饰水平的改变，以此方法可深入探讨同一启动子内不同顺式作用元件甲基化修饰水平变化对基因转录活性的影响。

成果亮点
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成果资料