本发明公开了一种表面活性剂酶纳米复合催化剂的制备方法与应用。该方法包括:配制***表面活性剂水溶液,室温下,边搅拌边滴加游离酶水溶液至澄清,得混合液;将混合液边搅拌边滴加至***金属离子盐溶液,室温下搅拌反应30-60min后得表面活性剂酶的纳米复合催化剂水溶液;将表面活性剂酶的纳米复合催化剂水溶液离心,并用去离子水冲洗1-3次,洗去未吸附的游离酶,真空冷冻干燥至恒重即可。本发明采用水相溶液混合法制备,操作简单、周期短、条件温和、成本低廉、酶稳定性高、酶活收率高、载体酶分子结合强度高,尤其适合在水油两相生物催化中的应用。