本发明公开了一种槲皮素糖苷的生物合成方法,将糖基转移酶UGT73G1突变体的基因与蔗糖合酶基因连接得到重组质粒,构建含双酶体系的重组菌;将重组菌接种于LB液体培养基中,培养,添加诱导剂乳糖诱导,发酵液离心收集菌体,菌体破碎,离心收集上清液得到粗酶液;将槲皮素或异槲皮素溶于DMSO中,加入粗酶液、蔗糖,反应,离心得上清槲皮素二葡萄糖糖苷。所述糖基转移酶UGT73G1突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO:1所示序列发生V371A和/或F381Y突变的氨基酸序列。该突变体制备简单,产量大,实现了槲皮素二葡萄糖糖苷产量的提高。