科创中国

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及蒺藜苜蓿 microRNA-SSR 分子标记引物

及在苜蓿品种鉴定中的应用。

背景技术

根据我国《植物新品种保护条例》规定：植物新品种必须具备特异性、一致

性和稳定性(简称 DUS)，才能授予植物新品种权。DUS 测试技术体系包括以植物

农艺学形态特征测试为主导的传统测试技术和对基因型测试的分子辅助技术两

部分。随着我国植物育种和种子贸易的发展，对植物新品种的保护及育种家权益

的保障的重要性日益凸显。

苜蓿是全球种植面积最大的豆科牧草，具有广泛的生态适应性、稳定的生产

力及较高的营养价值，具有“牧草之王”的称号，在我国农牧业生产和生态经济

建设中发挥着巨大作用。近年来，随着畜牧业的快速发展，我国在苜蓿品种培育

和审定工作方面也取得了重要进展。目前，苜蓿新品种的审定和品种真实性的鉴

定方法主要是通过田间种植，根据其形态学特征进行鉴别。但这种方法费时费力、

容易受环境和主观因素的影响。另外，由于苜蓿骨干亲本的集中使用，从而导致

育成品种间性状差异日趋狭窄，使得通过形态学特征进行品种鉴定变得更加困

难。因此，建立一套快速、精确、廉价的苜蓿品种鉴定技术，显得非常必要。

近年来，以 PCR 技术为基础的分子标记技术，如 RAPD、SCAR、SSR、ILP 等，

已经被广泛用于植物品种鉴定。MicroRNA(miRNA)是生物体内普遍存在的非编码、

长度约 16～29nt 的小分子 RNA，在转录后水平通过介导靶 mRNA 降解或翻译抑

制调控基因表达，从而作为一类重要调控因子参与植物整个生长发育进程调控。

根据 miRNA 序列开发出的 microRNA-SSR(miRNA-SSR)分子标记较之其它类型的分

子标记具有功能相关性、基因组分布广泛、多态性丰富、重现性强以及广泛的通

用性等特点，可用于品种鉴定、系统发育分析、遗传多样性分析以及遗传连锁作

图等方面。作为一种新型的分子标记，迄今为止，miRNA-SSR 标记主要在模式植

物水稻中得到开发和应用，但在非模式植物苜蓿中，miRNA-SSR 引物的开发以及

在品种鉴定中的应用尚未见报道。因此，在全基因组水平开发蒺藜苜蓿 miRNA-SSR

分子标记并研究其在其近缘种苜蓿鉴定中的应用，对苜蓿品种进行高效、快速的

鉴定以及进行分子标记辅助育种具有重要意义。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

蒺藜苜蓿 miRNA-SSR 分子标记引物，所述分子标记引物包括如实施例所述

10 对。

蒺藜苜蓿 miRNA-SSR 分子标记引物在苜蓿品种鉴定中的应用。